[x] x концентрация (x = анализируемый материал)
BLV Bovine leukemia virus (Вирус лейкемии КРС)
C5a Complement factor 5a (Факор комплемента)
CBC Complete blood count (Общий анализ крови)
CD Cluster of differentiation or designation (Кластер дифференциации или обозначения)
CLP Circulating lymphocyte pool (Пул циркулирующих лимфоцитов)
CNP Circulating neutrophil pool (Пул циркулирующих нейтрофилов)
CXCL Chemokine (C-X-C motif ) ligand (Лиганд хемокина)
CXCR Chemokine (C-X-C motif ) receptor (Рецептор хемокина)
EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid (Этилендиаминтетрауксусная кислота)
FeLV Feline leukemia virus (Вирус лейкемии кошек)
G-CSF Granulocyte colony-stimulating factor (Гранулоцитарный колониестимулирующий фактор)
GM-CSF Granulocyte/macrophage colony-stimulating factor (Гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор)
IgE Immunoglobulin E (Иммуноглобулин Е)
IL-x Interleukins (x for Arabic numbers) (Интерлейкины (x для арабских цифр))
IMN Immune-mediated neutropenia (Иммуноопосредованная нейтропения)
LAD Leukocyte adhesion deficiency (Дефицит адгезии лейкоцитов)
LRL Lower reference limit (Нижний контрольный предел)
LTB4 Leukotriene B4 (Лейкотриен)
MALT Mucosa-associated lymphoid tissue (Лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистой оболочкой)
MLP Marginated lymphocyte pool (Пул пристеночных лимфоцитов)
MNP Marginated neutrophil pool (Пул пристеночных нейтрофилов)
MPP Multipotent progenitor cell (Мультипотентная клетка-предшественник)
MPS Mucopolysaccharidosis (Мукополисахаридоз)
NK Natural killer (Натуральный киллер)
NMP Neutrophil maturation pool (Пул созревания нейтрофилов)
NPP Neutrophil proliferation pool (Пул пролиферации нейтрофилов)
NSP Neutrophil storage pool (Пул хранения нейтрофилов)
nRBC Nucleated erythrocyte (nucleated red blood cell)
PAF Platelet-activating factor (Фактор активации тромбоцитов)
PCR Polymerase chain reaction (ПЦР)
RI Reference interval (Референсный интервал)
TNF Tumor necrosis factor (may be specified as α or β form) (Фактор некроза опухоли (может быть указан в форме α или β))
TSLP Thymic stromal lymphopoietin (Thymic stromal lymphopoietin)
URL Upper reference limit (Верхний контрольный предел)
WBC White blood cell (leukocyte) (Белые клетки крови)
WRI Within reference interval (В пределах референтного интервала)

I. Лейкон (от греч. leukos – белый): все лейкоциты (белые кровяные клетки, WBC) у животного, включая предшественников WBC, лейкоциты в кровеносных и лимфатических сосудах и внесосудистые лейкоциты во всех других тканях.
A. Костный мозг содержит предшественники нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, моноцитов (а также макрофагов и остеокластов, в которые некоторые из них превращаются), лимфоцитов, дендритных клеток и тучных клеток (последние два считаются тканевыми лейкоцитами).
1. Лейкопоэз (-poiesis от греч. «делать») является частью кроветворения (гемопоэза), представляющего собой сложную систему, включающую стволовые клетки, способные к самообновлению и дифференцировке в сторону комитированной клеточной линии (рисунок 2.1).
2. Стволовые клетки присутствуют в крови и других тканях, включая костный мозг, селезенку и печень, но их невозможно распознать с помощью обычной микроскопии, поскольку они похожи на малые лимфоциты.
3. Специфические стимулы и регуляторы управляют дифференцировкой и выработкой лейкоцитов.
B. Другими основными органами, участвующими в производстве и регуляции лейкоцитов, являются тимус, лимфатические узлы, селезенка и MALT.
C. Большинство лейкоцитов в крови находятся в пути от мест образования к местам функционирования или разрушения; лишь немногие лейкоциты функционируют в сосудистом русле.
D. Внесосудистые лейкоциты
1. Гранулоциты (нейтрофилы, эозинофилы и базофилы) выполняют свою роль в защите организма и погибают. Гранулоциты также называют полиморфноядерными лейкоцитами, термин, который некоторые используют специально для нейтрофилов.
2. Лимфоциты могут трансформироваться и пролиферировать (подвергаться бластогенезу), возвращаться в кровь по лимфатическим сосудам или погибать.
3. Моноциты могут трансформироваться в дендритоподобные клетки или макрофаги, которые выполняют защитные функции организма и погибают. Макрофаги также могут размножаться или превращаться в остеокласты.
4. Незрелые дендритные клетки распределяются по органам по всему телу, особенно по тем, которые контактируют с внешним миром. Когда подвижные дендритные клетки контактируют с видимым антигеном, они созревают и мигрируют через кровь или лимфатические сосуды в селезенку или лимфатические узлы, передают антиген Т-лимфоцитам и в конечном итоге погибают.
5. Предшественники тучных клеток дифференцируются в тканевые тучные клетки (в основном за пределами костного мозга), выполняют свою роль в защите организма и в конечном итоге погибают. (Хотя в медицине человека их иногда относят к гранулоцитам, в ветеринарии они не считаются гранулоцитами)

II. Основные функции WBC
A. В совокупности лейкоциты помогают поддерживать гомеостаз посредством наблюдения и врожденных и адаптивных реакций на внешние (например, микроорганизмы) и внутренние (например, атипичные клетки) угрозы, а также способствуют восстановлению поврежденных тканей и удалению мертвых клеток. Эти мероприятия продолжаются, и каждый день генерируются миллиарды лейкоцитов, но они проходят в клинической тишине до тех пор, пока угроза не станет слишком серьезной или ответные меры не окажутся неэффективными.
B. При клиническом или субклиническом течении заболевания обычное лабораторное обследование может выявить аномалии лейкоцитов, которые отражают патологическое или физиологическое состояние. Понимание основных функций лейкоцитов, обнаруживаемых в крови, помогает понять их значимость (таблица 2.2). Однако роль некоторых из этих типов клеток далеко не ясна, в настоящее время выявляются новые подтипы лейкоцитов (например, нейтрофилы, моноциты, базофилы), а видовые различия в значительной степени неизвестны.

III. Пулы и кинетика нейтрофилов (движение нейтрофилов) (рис. 2.2)
A. Нейтрофилы костного мозга
1. G-CSF, GM-CSF, IL-1, IL-3, IL-6 и некоторые продукты жизнедеятельности микроорганизмов стимулируют гранулопоэз. G-CSF, основной регулятор продукции нейтрофилов, способствует присоединению клеток-предшественников к миелоидной линии (КОЕ-G), способствует пролиферации предшественников в пролиферативном пуле нейтрофилов (NPP, митотический пул), ускоряет созревание клеток в пуле созревания (NMP, постмитотический пул) и способствует выходу нейтрофилов в кровь.
2. Миелобласты, програнулоциты (промиелоциты) и миелоцитарные клетки делятся и созревают в NPP. У здоровых млекопитающих предшественники нейтрофилов находятся в этом пуле около 3 дней.
3. В NMP метамиелоциты созревают до ленточных нейтрофилов, а затем до сегментоядерных нейтрофилов. Сегментоядерные нейтрофилы, готовые к высвобождению в синусоидах костного мозга, находятся в подпуле, называемом NSP (пул хранения нейтрофилов). У здоровых собак нейтрофильные клетки находятся в NMP около 4 дней. Соотношение NMP:NPP составляет примерно 4-6, что означает, что количество ячеек в NMP в 4-6 раз превышает количество ячеек в NPP
4. В здоровом состоянии сегментоядерные нейтрофилы удерживаются в костном мозге в основном за счет синусоидального эндотелия, факторов адгезии и баланса хемокинов.5 G-CSF, основной фактор, способствующий миграции нейтрофилов из костного мозга в кровь, изменяет этот баланс и уменьшает задержку нейтрофилов в костном мозге.
a. Влияние G-CSF на хемокины: Хемокин CXCL12 (стромальный фактор 1, SDF1) выделяется из стромальных клеток, включая остеобласты, и способствует удержанию нейтрофилов в костном мозге, связываясь со своим рецептором (CXCR4) на нейтрофилах. Напротив, CXCL2, экспрессируемый на эндотелиальных клетках (и мегакариоцитах), способствует проникновению в синусоиды костного мозга посредством связывания с нейтрофильным рецептором CXCR2. G-CSF быстро снижает выработку CXCL12, способствует отщеплению CXCR4 от нейтрофилов и увеличивает экспрессию эндотелиального CXCL2, тем самым способствуя их трансцеллюлярной миграции через синусоидальный эндотелий в системный кровоток.
b. Влияние G-CSF на молекулы адгезии: Интегрин VLA-4 (очень поздний антиген-4, CD49d/CD29), экспрессируемый нейтрофилами костного мозга, также способствует удержанию нейтрофилов в костном мозге, связывая клетки со стромальной VCAM-1 (молекулой адгезии сосудистых клеток 1, CD106). G-CSF снижает экспрессию VCAM-1.
c. Другие факторы, высвобождающие нейтрофилы, включают хемоаттрактанты (C5a, IL-8, n-формилметиониллейцилфенилаланин, LTB4 и PAF) и цитокиновые факторы лейкоцитоза (IL-1, IL-6, TNFα, TNFβ и GM-CSF).
B. Нейтрофилы крови
1. Считается, что у здоровых особей период полураспада нейтрофилов в крови составляет около 5-10 часов. Однако их общий период полураспада является спорным и может достигать 3-4 дней, в зависимости от того, как долго они могут сохраняться в тканях и в каком количестве они могут выходить из крови и возвращаться в нее путем обратной миграции.
2. Нейтрофилы крови распределяются на два пула в зависимости от их расположения в сосудах.
а) Нейтрофилы, которые свободно циркулируют в крови (и, таким образом, собираются в образцах крови), находятся в CNP (Пул циркулирующих нейтрофилов).
b. Нейтрофилы, которые временно прикрепляются к эндотелиальным клеткам, находятся в MNP (Пул пристеночных нейтрофилов), которая расположена в основном в мелких капиллярах, посткапиллярных венулах или синусоидах, где кровоток замедлен и нейтрофилы имеют наибольшую возможность контактировать с эндотелиальными клетками (потенциально в легких, печени, селезенке и костном мозге). После адгезии нейтрофилы могут отделиться и вновь попасть в CNP (например, при увеличении кровотока из-за физической активности или приема адреналина) или мигрировать во внесосудистый пул нейтрофилов (EVNP).
c. У большинства млекопитающих соотношение MNP:CNP близко к 1. У кошек это соотношение составляет ~3.
3. Основные процессы, влияющие на измеряемую концентрацию нейтрофилов в крови
a. Производство
(1) Наличие и количество стимуляторов кроветворения
(2) Пролиферация и дифференцировка стволовых клеток
(3) Эффективность созревания
b.Высвобождение из кроветворной ткани: Самые старые или наиболее зрелые нейтрофилы предпочтительно покидают костный мозг, поскольку у них снижена экспрессия факторов удержания (CXCR4 и VLA-4) и повышена экспрессия рецепторов (CXCR2) для хемокина CXCL2, способствующего выходу.
c. Распределение нейтрофилов между CNP и MNP
d. Миграция из крови: По сравнению с менее зрелыми нейтрофилами, зрелые сегментоядерные нейтрофилы обладают большей способностью к миграции из крови.
4. Если нейтрофилы проникают в воспаленную ткань, они могут покидать кровь в результате активного процесса, включающего слабую адгезию, прочную адгезию и миграцию, в основном через посткапиллярные венулы. На это требуется 5-45 минут.
a. Воспалительные цитокины (включая IL-1 и TNF из макрофагов и IFNγ из лимфоцитов) стимулируют эндотелиальные клетки продуцировать и экспрессировать белки адгезии (селектины), которые опосредуют “перекатывание” нейтрофилов (адгезивные взаимодействия между ними) путем связывания с комплементарными лигандами на нейтрофилах. Нейтрофилы также экспрессируют селектины, которые связываются с комплементарными лигандами на эндотелиальных клетках. Эти взаимодействия могут преодолевать силу тока крови и прикреплять нейтрофилы к стенке сосуда.
б. Эндогенные химические медиаторы, включая LTB4 и PAF, активируют нейтрофилы, что приводит к экспрессии высокоаффинных мембранных белков, называемых интегринами. Интегрин нейтрофилов (CD11a/CD18) связывается с рецепторами эндотелиальных клеток (молекулами межклеточной адгезии 1 и 2), что приводит к плотной адгезии.
c.Плотно слипшиеся нейтрофилы претерпевают перестройку цитоскелета, что позволяет им ползти по поверхности просвета эндотелиальных клеток и мигрировать через соединения эндотелиальных клеток (в основном) и через эндотелиальные клетки (реже). Нейтрофилы являются альтернативными партнерами по связыванию, которые позволяют “расстегивать молнию” на плотных соединениях, когда они проникают через стенку сосуда между клетками.
d. Вне сосуда нейтрофилы ползут вдоль перицитов, затем перемещаются между ними, проникают через базальную мембрану, отделяются и движутся по химическому градиенту к источнику хемотаксиса (например, LTB4, C5a, IL-8, PAF, бактериальным продуктам).
5. Основываясь на исследованиях на мышах, было высказано предположение, что с возрастом циркулирующих нейтрофилов экспрессия хемокинового рецептора CXCR4 увеличивается, в то время как экспрессия хемотаксического рецептора CXCR2 снижается, что способствует самонаведению и трансэндотелиальной миграции обратно в богатый CXCL12 костный мозг, где клетки подвергаются апоптозу и фагоцитозу резидентными макрофагами. Такой фагоцитарный клиренс стареющих нейтрофилов в костном мозге может способствовать локальной выработке G-CSF и, следовательно, стимулировать нейтропоэз для поддержания количества нейтрофилов. Напротив, при удалении нейтрофилов макрофагами из очагов воспаления выработка G-CSF, по-видимому, снижается, что ограничивает воспаление. Контроль выработки нейтрофилов различается в зависимости от гомеостатического и воспалительного состояний и менее изучен в процессе гомеостаза.
C. Внесосудистые нейтрофилы
1. Считается, что большинство нейтрофилов, которые мигрировали из крови, выполняют свои воспалительные функции, погибают в результате апоптоза или другими способами и подвергаются фагоцитозу, никогда не возвращаясь в кровь.
2. Однако есть свидетельства того, что некоторые нейтрофилы могут мигрировать из воспаленного участка и возвращаться в кровь по лимфатическим каналам или в обратном направлении через трансэндотелиальную миграцию по кровеносным сосудам.
3. Считается, что при отсутствии заболевания большая часть нейтрофилов животного погибает после попадания в дыхательные пути или в просвет желудочно-кишечного тракта, или же они удаляются из печени, селезенки и костного мозга, как описано выше для нейтрофилов крови, находящихся в состоянии, предшествующем апоптозу.

IV. Пулы и кинетика лимфоцитов
A. Первичные лимфоидные органы: костный мозг и тимус
1. В-лимфоциты, Т-лимфоциты и врожденные лимфоидные клетки (включая NK-клетки) образуются из гемопоэтических стволовых клеток в кроветворной ткани, в первую очередь в костном мозге домашних млекопитающих (рис. 2.1).
2. Клетки, которые станут В-лимфоцитами, могут созревать в костном мозге или в других тканях, скорее всего, в кишечнике. У птиц они созревают в бурсе Фабрициуса, клоачном дивертикуле, который является источником обозначения “В”.
3. Клетки, которые станут Т-клетками, должны созреть в тимусе (отсюда название “Т”). У молодых животных тимус инволюционирует после того, как сформируется большой набор Т-клеток.
B. Вторичные лимфоидные органы и ткани: лимфатические узлы, селезенка и MALT (mucosa associated lymphoid tissue— система лимфоидной ткани, ассоциированная со слизистыми оболочками)
1. Вторичные лимфоидные органы содержат организованную лимфоидную ткань с Т- и В-лимфоцитарными компонентами, включая фолликулы. Они обеспечивают обнаружение антигенных веществ в крови и лимфе и являются важными участками для инициации и контроля адаптивных иммунных реакций.
2. Лимфатические узлы расположены широко, и к ним поступает лимфатическая жидкость с большей части тела. Вместе с лимфатической жидкостью поступают потенциальные антигены, а также лимфоциты и дендритные клетки. Лимфоциты и некоторые дендритные клетки также активно проникают в лимфатические узлы через высокие эндотелиальные венулы и специфические взаимодействия молекул адгезии.
а) Дендритные клетки обеспечивают обнаружение антигенов по всему организму и доставку их в лимфоидную ткань для обработки.
b. Лимфоциты, попадающие в лимфатический узел, перемещаются по нему по хемотаксическому градиенту, контактируя со многими клетками по пути и потенциально стимулируя экспансию реактивного клона. Большинство лимфоцитов покидают его через несколько часов или сутки через эфферентные лимфатические сосуды, которые в конечном итоге достигают грудного протока, откуда лимфоциты попадают в кровь для распределения по другим тканям.
3. Селезенка содержит большое количество лимфоцитов (белая пульпа), но в ней нет лимфатических сосудов, к которым она прикрепляется. Вместо этого лимфоциты попадают в селезенку из крови. Артериолы выделяют кровь в сосудистые синусы (красную пульпу) вблизи границы красной и белой пульп, и клетки крови проходят через красную пульпу и выходят в вены. Перемешивание в пограничной зоне между красной и белой пульпой способствует взаимодействию иммунных клеток. Оттуда некоторые лимфоциты проникают в белую пульпу; Т-лимфоциты притягиваются к периартериолярной ткани, образуя периартериолярные лимфоидные оболочки, а В-лимфоциты притягиваются к близлежащим фолликулам. Затем оба типа клеток мигрируют в красную пульпу, вероятно, под действием химического градиента, и покидают селезенку по венам. Обычный лимфоцит тратит несколько часов на прохождение через селезенку. Эфферентный лимфодренаж может играть небольшую роль в прохождении лимфоцитов.
4. MALT - это неинкапсулированная вторичная лимфоидная ткань, важная для контроля внешних границ: кишечника (GALT, G - кишечник), дыхательных путей (BALT, B - бронхи), носовых пазух (NALT), конъюнктивы (CALT), миндалин и мочеполовых путей. Лимфоциты MALT обычно перемещаются по лимфатическим путям к дренирующим лимфатическим узлам, а затем в кровь и обратно к MALT или другим участкам, где они выполняют свои функции. Лимфоциты крови попадают в MALT через высокие эндотелиальные венулы, как и в лимфатические узлы, но с помощью различных комбинаций молекул адгезии, которые обеспечивают направленный транспорт к определенным тканям.
C. Лимфоциты крови
1. В здоровом организме постоянная циркуляция лимфоцитов из крови в лимфоидную или другую ткань и обратно в кровь приводит к полному обновлению популяции лимфоцитов крови много раз в день. Обычно лимфоцит остается в крови менее часа.
2. Как и нейтрофилы, лимфоциты делятся на два пула, CLP и MLP; переключение между пулами, вероятно, происходит при изменении кровотока и экспрессии молекул клеточной адгезии.
3. В крови домашних млекопитающих преобладают Т-лимфоциты (около 60-80% лимфоцитов), но большинство типов лимфоцитов невозможно дифференцировать с помощью обычной микроскопии. Лимфоциты, содержащие цитоплазматические гранулы, называются Т-лимфоцитами или NK-лимфоцитами.
D. Основные процессы, влияющие на измеряемую концентрацию лимфоцитов в крови
1. Производство
a. Пролиферация и дифференцировка стволовых клеток (в основном костного мозга)
b. Постактивационная пролиферация (в других тканях)
2. Распределение лимфоцитов между CLP и MLP
3. Экстравазация во вторичные лимфоидные органы или другие ткани
4. Миграция из лимфатических узлов по эфферентным лимфатическим сосудам в кровь
5. Потеря из организма или гибель лимфоцитов
E. Продолжительность жизни лимфоцитов варьируется от нескольких часов до нескольких лет, при этом большинство лимфоцитов, вероятно, живут от нескольких недель до нескольких месяцев. Наивные лимфоциты (еще не активированные специфическим антигеном) могут жить годами, в то время как лимфоциты памяти и эффекторные лимфоциты - нет; стойкость иммунологической памяти превышает продолжительность жизни лимфоцитов памяти, определенную на сегодняшний день. Ожидаются видовые различия в продолжительности жизни.
F. Лимфоциты в нелимфоидных тканях
1. Некоторые лимфоциты, особенно клетки памяти, мигрируют в нелимфоидные ткани, такие как кожа, через плоские или высокоэндотелиальные венулы, в процессе, опосредованном специфическими наборами молекул адгезии и хемокинов. Эти клетки могут возвращаться в лимфатические узлы по лимфатической системе.
2. Лимфоциты, которые активизируются в тканях, могут задерживаться там или возвращаться во вторичные лимфоидные органы по лимфатическим каналам. Там они могут привлекать другие клетки и подвергаться реактивной трансформации и пролиферации с образованием клеток, которые циркулируют по крови к определенным целевым участкам.
3. Третичная лимфоидная ткань возникает в ответ на воспаление (например, при инфекциях, аутоиммунных заболеваниях или раке) и может напоминать вторичную лимфоидную ткань по организации и функциям.

V. Пулы и кинетика моноцитов
A. Моноциты и нейтрофилы имеют общую клетку-предшественницу, дифференцировка которой стимулируется цитокинами, в частности колониестимулирующим фактором макрофагов (M-CSF, CSF-1) и GM-CSF (CSF-2) (рис. 2.1).
B. Моноциты развиваются из монобластов и промоноцитов и обычно составляют менее 2 % ядросодержащих клеток в костном мозге в здоровом состоянии. У людей постмитотическое созревание занимает 1-2 дня, но при воспалении сокращается. Моноциты мигрируют из костного мозга в кровеносные сосуды посредством процесса, в котором участвуют моноцитарный хемоаттрактантный белок 1 и его моноцитарный рецептор (CCR2).
C. После высвобождения из костного мозга моноциты распределяются между изолированным и циркулирующим пулами. Пограничный пул моноцитов отличается от пограничного пула нейтрофилов тем, что он включает подмножество моноцитов, которые обычно остаются внутрисосудистыми и изолированными для выполнения своей основной функции - патрулирования сосудистого эндотелия. Он также содержит относительно большой запас моноцитов, которые удерживаются в кровеносных сосудах костного мозга и красной пульпе селезенки благодаря взаимодействию хемокинов; эти клетки могут быть мобилизованы в течение нескольких минут.
D. Подтипы моноцитов с различными функциями и иммунофенотипическими маркерами были охарактеризованы у мышей и людей и обнаружены у некоторых домашних млекопитающих, включая собак, но они не различаются при обычной микроскопии.
1. Классические (воспалительные) моноциты являются преобладающим подтипом (> 80 %) в циркулирующей крови. У людей ~99% моноцитов остаются в крови в течение ~1 дня, прежде чем покинуть кровоток в результате миграции или смерти. Некоторые классические моноциты могут быть изолированы в сосудах с низким кровотоком, и они являются существенным компонентом внутрисосудистого резерва костного мозга.
2. Около 1 % классических моноцитов, по-видимому, остаются в сосудистой сети и дифференцируются в промежуточные, а затем в неклассические (патрулирующие) моноциты с продолжительностью жизни около 4 и 7 дней соответственно (у людей). Эти моноциты в значительной степени изолированы, располагаясь вдоль эндотелия; в здоровом состоянии они составляют менее 20 % циркулирующих моноцитов, но могут уменьшаться при изменениях кровотока, вызванных физической нагрузкой или приемом катехоламинов.
E. Как и другие лейкоциты, моноциты, которые мигрируют в ткани, делают это с помощью молекул адгезии и хемокинов, которые способствуют связыванию с эндотелиальными клетками и перемещению через них. Попав в ткани, моноциты могут дифференцироваться в клетки мононуклеарной фагоцитарной системы - сети клеток по всему организму, выполняющих фагоцитарную и антигенпредставляющую функции.
F. Система мононуклеарных фагоцитов включает макрофаги, дендритные клетки и моноциты - популяции, которые пересекаются по внешнему виду и функциям и которые не были последовательно классифицированы и названы. Например, кожная клетка Лангерганса долгое время считалась дендритной клеткой из-за ее внешнего вида и миграции в лимфатические узлы для презентации антигена, но она также считалась макрофагом из-за своего эмбрионального происхождения и способности к самообновлению.
1. Большинство макрофагов развиваются не из моноцитов костного мозга взрослой особи, а из эмбриональных или фетальных кроветворных клеток и пополняются за счет самообновления. Это относится, например, к клеткам Купфера, альвеолярным макрофагам, макрофагам красной пульпы селезенки и клеткам микроглии. Некоторые резидентные тканевые макрофаги также развиваются из моноцитов костного мозга; это особенно важно для тканей кишечника и кожи. Клетки с типичным внешним видом макрофагов не встречаются в крови здоровых млекопитающих.
2. Дендритные клетки, включая обычные, плазмацитоидные и моноцитарные подтипы, являются мобильными или, реже, неподвижными клетками, основной ролью которых является презентация антигена, таким образом, связывая врожденную иммунную систему с адаптивным иммунитетом. Они происходят от моноцитодендритных клеток-предшественников (или от В-лимфоидных клеток-предшественников некоторых плазмацитоидных дендритных клеток), но дифференцировка дендритных клеток не обнаруживается при микроскопическом исследовании костного мозга. Точно так же они редки и не обнаруживаются в мазках крови. Они приобретают свой дендритный вид после выделения из крови.
3. Как уже отмечалось, некоторые моноциты остаются в сосудистой сети, а другие мигрируют в ткани, где они выполняют свои функции или, как предполагается, дифференцируются в макрофаги и либо дендритные, либо дендритоподобные клетки. Воспаление изменяет популяции макрофагов и дендритоподобных клеток в ткани, вероятно, из-за притока клеток, полученных из костного мозга; однако резидентные клетки также могут вносить свой вклад посредством митоза.
G. Основными процессами, влияющими на концентрацию моноцитов в крови, являются образование, высвобождение из кроветворной ткани, распределение между циркулирующим и изолированным пулами и миграция из крови.

VI. Пулы эозинофилов и кинетика
A. Эозинопоэз неспецифически стимулируется цитокинами, включая GM-CSF, и, в частности, IL-5, который продуцируется несколькими типами клеток, включая Т-лимфоциты, NK-лимфоциты, тучные клетки, некоторые эпителиальные клетки и эозинофилы. IL‑5 способствует развитию и высвобождению эозинофилов.
В. Эозинофилы, которые покидают костный мозг, распределяются по изолированным и циркулирующим в крови группам. Считается, что у людей продолжительность их жизни в крови составляет чуть более 1 дня (примерно в 2,5 раза больше, чем у нейтрофилов). Они проникают в ткани в результате многоступенчатого процесса свертывания лейкоцитов, прочной адгезии и трансэндотелиальной миграции, которые контролируются молекулами адгезии и хемокинами, включая эотаксины.
C. Эозинофилы – преимущественно внесосудистые клетки. В норме они присутствуют во многих тканях, но особенно в собственной пластинке кишечника, где они важны для иммунитета, опосредованного IgA. Вне крови они могут существовать от нескольких дней до нескольких недель.
D. На концентрацию эозинофилов в крови влияют их выработка, высвобождение из кроветворной ткани, распределение между циркулирующим и изолированным пулами и миграция из крови.

VII. Пулы базофилов и кинетика
A. Базофилы образуются в костном мозге (рис. 2.1), где их выработка и дифференцировка контролируются преимущественно IL-3 (в основном из Т-лимфоцитов) и TSLP из стромальных клеток и некоторых эпителиальных клеток.27 IL-3 способствует образованию, созреванию и функционированию базофилов, но он также способствует образованию тучных клеток. TSLP более специфичен для базофилов. Циркулирующие продукты жизнедеятельности микроорганизмов, по-видимому, также участвуют в регуляции образования базофилов.
В. Были выявлены два функционально, но микроскопически не отличных подтипа базофилов: один вырабатывается в ответ на IL-3, который подвергается IgE-опосредованной активации, и другой, вызываемый TSLP, который подвергается IgE-независимой активации.
C. Время прохождения базофилов человека через костный мозг, по оценкам, составляет ~4 дня, продолжительность их циркулирующей жизни составляет ~3-4 дня, и они могут сохраняться до 2 недель после того, как покинут кровь.
D. Эмиграция базофилов из крови стимулируется IL-1, TNFα и эндотоксином и, по-видимому, аналогична процессу, используемому другими лейкоцитами. Базофилы присутствуют в крови домашних млекопитающих в низкой концентрации.

VIII. Кинетика тучных клеток
A. Предшественники тучных клеток присутствуют в костном мозге (рис. 2.1) и в конечном итоге образуются из коммитированной стволовой клетки, которая отличается от коммитированной стволовой клетки базофила. Их продукция поддерживается ИЛ-3 и фактором стволовых клеток, причём последний связывается со своим тирозинкиназным рецептором c-kit.
B Недифференцированные, но активированные тучные клетки покидают костный мозг в очень небольшом количестве и циркулируют в крови, но распознаются только специальными методами, которые не используются в клинической практике. Они прочно закрепляются в тканях посредством селективных молекул адгезии и хемокиновых взаимодействий, особенно на поверхностях слизистых оболочек (например, кишечника, легких) и периваскулярных тканях.
C. После экстравазации предшественники тучных клеток могут функционировать без дифференцировки, пролиферировать посредством митоза, дифференцироваться в тучные клетки или погибать.
1. Предшественники тучных клеток дифференцируются в структурно, функционально и химически различные подтипы тучных клеток в зависимости от микроокружения. Зрелые тучные клетки обычно считаются терминальными клетками, которые не делятся.
2. Тучные клетки могут регранулировать после дегрануляции и, как было задокументировано, живут неделями и месяцами; иногда даже годами.
D.  Обнаружение дифференцированных тучных клеток в крови домашних млекопитающих отражает их поступление из тканей, в которых они созревали; это считается патологическим состоянием.

Лейкоцитоз - это повышенный уровень лейкоцитов, а лейкопения - сниженный уровень лейкоцитов. Значимость этих отклонений зависит от конкретного типа (ов) лейкоцитов, ответственных за них, и, таким образом, концентрации каждого типа лейкоцитов должны оцениваться индивидуально и с учетом закономерностей. Когда концентрация каждого типа лейкоцитов превышает допустимый уровень, используются следующие термины: нейтрофилия, лимфоцитоз, моноцитоз, эозинофилия и базофилия. Когда концентрация каждого типа лейкоцитов ниже его минимального значения, используются следующие термины: нейтропения, лимфопения, моноцитопения, эозинопения и базопения. В публикациях нередко эти термины используются для обозначения увеличения или уменьшения значений в одной группе по сравнению с другой группой, даже если значения остаются в пределах нормы.

1. Сдвиг влево (shift to the left, bandemia, band neutrophilia) - это повышенная концентрация несегментированных нейтрофилов (обычно палочкоядерынх) в крови. Когда воспалительные стимулы достаточно сильны, при сдвиге влево также могут присутствовать более молодые стадии (метамиелоциты, миелоцитарная группа и редко програнулоциты).
a. Термин «сдвиг влево» приписывается Йозефу Арнету, который в начале 1900-х годов составил таблицу нейтрофилов по их ядерной дольчатости, поместив самую незрелую форму (класс 1) в левый столбец, а самую дольчатую форму (класс 5) — в правый столбец. Он упомянул сдвиг картины крови влево («Verschiebung des Blutbildes nach links», стр. 32), когда числа увеличивались в левых столбцах таблицы и уменьшались в столбцах справа.
b. Палочкоядерный нейтрофил (не сегментоядерный нейтрофил) — это незрелый нейтрофил с палочковидным ядром, то есть ядро имеет почти параллельные стороны без четкой сегментации или существенных углублений (в форме буквы C, S или U)50, и оно чаще всего шире с менее зрелым хроматином (бледнее, менее слипшимся), чем сегментоядерные нейтрофилы в том же образце. Однако различие между палочкоядерными и сегментоядерными нейтрофилами может быть неясным по нескольким причинам, включая: вся форма ядра нейтрофила может быть неразличима (например, ядро загибается назад, созревание происходит по спектру, что создает вопросы о том, когда углубления достаточно существенны, чтобы классифицировать клетки как сегментоядерные нейтрофилы, и созревание может быть изменено в ответ на заболевание или лекарства (см. токсичные нейтрофилы).
(2) Лаборатории могут попытаться свести к минимуму внутрилабораторные различия, но следует соблюдать осторожность, чтобы не переоценивать незначительные изменения концентрации нейтрофилов в группе, даже в одной и той же лаборатории.
(3) Некоторые автоматические гематологические анализаторы позволяют оценить степень незрелости нейтрофилов или гранулоцитов или сообщают о подозрении на незрелые формы;
Микроскопическое исследование следует использовать для подтверждения, опровержения или дальнейшей характеристики потенциальной незрелости. (Оценка незрелых гранулоцитов, используемая в некоторых гематологических анализаторах для человека, ограничивается метамиелоцитами, миелоцитами и промиелоцитами.)
c. Сдвиг влево происходит, когда выход нейтрофилов из костного мозга снижает количество нейтрофилов в незрелом костном мозге, и более молодые клетки затем высвобождаются из пула. Это может быть связано со снижением конкуренции со стороны зрелых клеток за хемокины, стимулирующие выход, или с вызванным цитокинами снижением экспрессии факторов задержки клеток или их рецепторов на незрелых нейтрофилах. Сдвиг влево происходит раньше у видов или особей с меньшим количеством нейтрофилов в незрелом костном мозге.
d. Поскольку сдвиг влево обычно возникает в ответ на относительно интенсивные, часто острые воспалительные стимулы, он часто считается отличительным признаком острого воспаления. Такое воспаление обычно вызывается инфекционными агентами (например, гноеродными бактериями, грибами),
но может быть вызвано и неинфекционными заболеваниями (например, некрозом, иммуноопосредованными заболеваниями или новообразованиями). Глюкокортикоидные гормоны и эндотоксины также стимулируют высвобождение нейтрофилов и, таким образом, могут вызывать лёгкий сдвиг влево.

2. Классификации сдвигов влево
a. Степень тяжести: при описании степени тяжести сдвига влево следует учитывать две особенности. Поскольку эти термины могут описывать разные результаты, следует быть осторожным при их интерпретации или использовании.
(1) Незрелость нейтрофилов при сдвиге влево: только палочкоядерные лейкоциты (1+ или незначительное); палочкоядерные лейкоциты и метамиелоциты (2+ или умеренное); палочкоядерные лейкоциты, метамиелоциты и миелоциты (3+ или выраженное)
(2) Величина концентрации несегментированных нейтрофилов: универсальных числовых пороговых значений нет, но < 1,0–2,0 × 103/мкл – лёгкая степень, > 10,0 × 103/мкл – выраженная, а промежуточные значения – умеренная. Выраженный сдвиг влево встречается нечасто у взрослых жвачных животных, лошадей, альпак и лам. Воспаление может быть выраженным, если сдвиг влево лёгкий, умеренный или выраженный.
b. Регенеративная и дегенеративная классификации со сдвигом влево
(1) Хотя определения противоречивы, клиническая значимость этих классификаций в целом схожа во всех определениях.
(а) Регенеративный сдвиг влево предполагает более благоприятное воспалительное состояние, при котором на момент взятия пробы выработка и высвобождение нейтрофилов адекватно реагируют на спрос.
(б) Дегенеративный сдвиг влево указывает на менее благоприятное воспалительное состояние, при котором выработка и высвобождение нейтрофилов неадекватно реагируют на потребность. Палочкоядерные нейтрофилы значительно менее способны к уничтожению бактерий и хемотаксису, чем сегментоядерные нейтрофилы (менее зрелые формы еще менее функциональны), поэтому при дегенеративном сдвиге влево оптимально функционирует меньший процент нейтрофилов.
(2) Из приведенной ниже недавней истории этих терминов следует, что сдвиг влево с преобладанием незрелых нейтрофилов является дегенеративным сдвигом влево, а сдвиг влево с нейтрофилией и преобладанием зрелых нейтрофилов является регенеративным сдвигом влево. В предыдущих публикациях не рассматривалось применение этих терминов к некоторым моделям лейкограммы, например, когда [нейтрофилов] становится меньше или когда они в пределах референтного интервала и зрелые нейтрофилы превосходят по численности незрелые. Однако сдвиг влево у пациента с нейтропенией, как правило, неблагоприятен, в то время как умеренный сдвиг влево при нейтрофилах в пределах референтного интервала может быть неблагоприятным, а может и не быть. Серийные данные ОАК часто проясняют реакцию нейтрофилов.
(3) В первых трёх изданиях «Ветеринарной гематологии» доктор О. В. Шальм попытался дать руководство по классификации левых сдвигов. В «Ветеринарной гематологии» Шальма (четвёртое издание) доктор Джайн описал эти состояния следующим образом:
(a) «Регенеративный левый сдвиг характеризуется лейкоцитозом, обусловленным нейтрофилией, и появлением незрелых нейтрофилов в периферической крови… При типичном регенеративном левом сдвиге соотношение различных незрелых нейтрофилов упорядочено и соответствует пирамидальному распределению, при этом наиболее незрелые клетки являются наименее многочисленными. Обычно зрелых нейтрофилов больше, чем незрелых».
(b) «Главным признаком дегенеративного сдвига лейкоцитарной формулы влево является появление в кровотоке молодых нейтрофильных гранулоцитов в количестве, превышающем количество зрелых нейтрофилов. Количество лейкоцитов часто указывает на лейкопению, но иногда может быть в пределах нормы или, реже, повышено».

Сдвиг вправо – это повышенная концентрация гиперсегментированных нейтрофилов в крови, которые у большинства наших домашних млекопитающих считаются нейтрофилами с пятью или более ядерными долями. Критерий семи или более ядерных долей был предложен для лошадей, поскольку лошадиные нейтрофилы имеют неровные края ядер (зазубренные ядра) с большим средним количеством ядерных сегментов – пятью в одном небольшом исследовании. Гиперсегментированные нейтрофилы без атипии обычно считаются признаком более старых клеток, которые состарились в крови из-за увеличения времени циркуляции. Наличие гиперсегментированных нейтрофилов в крови обычно регистрируется как комментарий в результатах общего анализа крови, а не как отдельная часть лейкоцитарно-лейкоцитарной формулы (если оно вообще отмечается).

1. Глюкокортикоидные гормоны (эндогенные или экзогенные) могут снижать эмиграцию нейтрофилов в ткани,
подавляя активность молекул адгезии или уменьшая апоптоз нейтрофилов и, следовательно, их выведение из кровотока, вызывая сдвиг вправо. Аналогичным образом, гиперсегментация может наблюдаться у пациентов с LAD (Дефицит адгезии лейкоцитов).

2. Гиперсегментированные нейтрофилы могут присутствовать при хронических воспалительных заболеваниях, особенно в период разрешения, когда стимулов для трансэндотелиальной миграции меньше (например, после гистерэктомии по поводу пиометры, когда костный мозг гиперплазирован, но очаг воспаления удален).

3. Атипичная, диспластическая и неопластическая гиперсегментация обсуждаются далее в этой главе (см. Аномальные морфологические особенности лейкоцитов, Раздел VII. Ядерная гиперсегментация, не связанная со старением клеток).

Нейтрофилия - (повышенная концентрация нейтрофилов в крови) (таблица 2.6)

1. Обратите внимание, что нейтрофилия – это повышенная концентрация всех нейтрофилов, а не только сегментоядерных. Концентрация сегментоядерных нейтрофилов может быть в пределах референтных интервалов, но суммарная концентрация сегментоядерных и палочкоядерных нейтрофилов может превышать сумму соответствующих верхних контрольных пределов, что указывает на нейтрофилию. Термин «нейтрофилия» иногда используется для описания повышения концентрации нейтрофилов в других тканях или промывных жидкостях.

2. Острая воспалительная нейтрофилия.
а. Эта нейтрофилия возникает в результате изменений в кинетике нейтрофилов, вызванных острыми медиаторами воспаления. Конечным результатом является повышение уровня CNP (пула циркулирующих нейтрофилов), которое может сопровождаться сдвигом влево (рис. 2.8B). Эта тенденция может сохраняться хронически (см. следующий раздел).
(1) Высвобождение из NSP (Пул хранения нейтрофилов) происходит в течение нескольких минут после начала воспаления и вызывает начальную нейтрофилию, если высвобождение превышает эмиграцию нейтрофилов в воспаленную ткань.
(2) Высвобождение из NMP (Пул созревания нейтрофилов) вызывает сдвиг влево и происходит в основном после уменьшения или истощения NSP.
(3) Повышенная выработка на стадии миелоцитов: требуется 2-4 дня, прежде чем в системной крови проявятся эффекты, более быстрые реакции происходят при большей стимуляции цитокинов для ускорения созревания и высвобождения.
(4) Увеличение выработки стволовых клеток: это приводит к гранулоцитарной гиперплазии. Проходит около 5 дней, прежде чем эффект проявляется в крови.
b. Для развития нейтрофилов медиаторы воспаления должны попасть в системный кровоток и стимулировать клетки костного мозга.
(1) Нейтрофилия ожидается при значительном остром воспалении подкожной клетчатки или многих других внутренних тканей (дыхательных путей, поджелудочной железы, брюшной или плевральной полости, а иногда и матки, печени или кишечника), поскольку медиаторы могут легко попадать в системный кровоток.
(2) Воспаление головного и спинного мозга, поверхностных кожных поражений и нижних мочевыводящих путей может не вызывать нейтрофилию, поскольку медиаторы теряются (выводятся в мочу или кожу) или не покидают защищенную среду (головной или спинной мозг).
c. Интенсивность воспалительной нейтрофилии варьируется в зависимости от вида и возраста у некоторых видов, поэтому интерпретация конкретных концентраций может различаться. Цель таблицы 2.7 — подчеркнуть необходимость интерпретации [нейтрофилов] в зависимости от вида. Например, [нейтрофилов] 20,0 × 103/мкл обычно вызывает воспаление у собак и кошек, но тот же [нейтрофилов] обычно не вызывает воспаление у взрослого крупного рогатого скота и лошадей. Данные в таблице 2.7 приведены в качестве руководства по интерпретации, а не в качестве пороговых значений.
d. Воспалительный нейтрофилёз у взрослого крупного рогатого скота обусловлен в первую очередь повышенной продукцией (гранулоцитарной гиперплазией), а не высвобождением накопленных нейтрофилов, поскольку у крупного рогатого скота NSP невелика. Нейтропения часто встречается при остром воспалении у крупного рогатого скота.
e. Термин «лейкемоидный ответ» использовался для описания любого выраженного лейкоцитоза (включая выраженную нейтрофилию), лейкемиоподобного, но не являющегося лейкемией. Согласно этому определению, этот термин может быть обоснованно применен только ретроспективно; его использование для лейкоцитоза, который подтверждён лейкемией, нецелесообразно, поскольку лейкоцитоз был вызван лейкемией, а не лейкемиоподобным (т.е. лейкемоидным) воспалительным процессом.
(1) Заболевания, связанные с выраженной воспалительной нейтрофилией, включают очаговые гнойные поражения (например, пиометру собак, плеврит или пиоторакс, перитонит, простатит, пневмонию и абсцессы) и гемолитическую анемию (например, иммуноопосредованную, бабезиоз). Другой причиной является гепатозооноз собак, вызванный Hepatozoon americanum.
(2) Паранеопластическая нейтрофилия и нейтрофилия LAD также могут быть выраженными и, следовательно, лейкемоидными (см. далее в этом разделе).
f. У животных с острой воспалительной нейтрофилией обычно наблюдается лимфопения, часто эозинопения или низконормальный уровень эозинофилов, а иногда и моноцитоз или токсические нейтрофилы. Все эти изменения могут быть вызваны воспалением, но эндогенные глюкокортикоиды могут быть причиной или способствовать появлению всех этих изменений, кроме токсических нейтрофилов. У собак может наблюдаться мастоцитемия.

3. Хроническая воспалительная нейтрофилия
а. Эта нейтрофилия возникает в результате изменений в кинетике нейтрофилов, когда воспалительный процесс продолжается не менее недели, в течение которой воспалительные медиаторы стимулируют развитие гранулоцитарной гиперплазии (рисунок 2.8C). В этом случае воспалительный стимул не настолько силён, чтобы миграция из крови превышала способность костного мозга обеспечивать нейтрофилы. При восполнении запасов нейтрофилов в костном мозге происходит выброс сегментоядерных нейтрофилов вместо палочкоядерных, и, таким образом, левый сдвиг лейкоцитарной формулы уменьшается. Кроме того, активируются другие защитные механизмы, и, таким образом, потребность в нейтрофилах в тканях может снизиться. Однако, если воспалительный стимул более интенсивен, левый сдвиг может сохраняться, или хронический воспалительный паттерн может никогда не быть достигнут. При этих заболеваниях наблюдается повышенная продукция нейтрофилов из-за гранулоцитарной гиперплазии и повышенного высвобождения нейтрофилов из костного мозга в ответ на воспалительные медиаторы. Когда скорость выхода нейтрофилов из костного мозга превышает скорость их маргинализации и миграции в ткани, развивается нейтрофилез.
б. При хронической воспалительной нейтрофилии у животного могут наблюдаться другие отклонения в количестве лейкоцитов, включая лимфоцитоз (с реактивными лимфоцитами или без них), лимфопению, моноцитоз, эозинофилию, базофилию, сдвиг формулы влево, сдвиг вправо или токсические нейтрофилы. Хроническое воспаление также может вызывать лёгкую анемию.

4. Острая и хроническая воспалительная нейтрофилия: Острая и хроническая воспалительная нейтрофилия образуют единый комплекс и могут приводить к сходным или идентичным показателям лейкограммы. Несмотря на то, что могут присутствовать признаки, указывающие на продолжительность воспаления (см. выше о сопутствующих изменениях, которые могут наблюдаться при каждом из них), отличить кратковременное воспаление от длительного только по лейкограмме ОАК часто невозможно. Оценка состояния костного мозга у пациентов с нейтрофилией обычно не проводится, поэтому состояние резервного фонда и степень миелопоэза обычно неизвестны. История болезни или предыдущие ОАК могут указывать на хронический характер, но более реалистичной целью является просто выявление признаков воспаления.

5. Повышенный уровень глюкокортикоидов (стероидная или “стрессовая” нейтрофилия)
а) Эта нейтрофилия возникает в результате изменений, вызванных воздействием эндогенных или экзогенных глюкокортикоидов на кинетику нейтрофилов (рис. 2.8, Г). Хотя эту нейтрофилию часто называют стрессовой нейтрофилией, ее не следует путать с физиологической (сдвиговой) нейтрофилией, вызванной высвобождением катехоламинов, вызванным стрессом.
(1) Нейтрофилы переключаются с MNP (Пул пристеночных нейтрофилов)) на CNP (Пул циркулирующих нейтрофилов) из-за снижения экспрессии селектин нейтрофилов (для свертывания клеток) и молекулы адгезии эндотелиальных клеток (для прочная адгезия). Исследования на кроликах показали, что снижение экспрессии селектина происходит в нейтрофилах, находящихся в процессе созревания костного мозга, а не в тех, которые находятся в кровотоке.
(a) Этот процесс может удвоить измеренную концентрацию нейтрофилов в крови собак, лошадей и крупного рогатого скота. В крови кошек может наблюдаться более значительное увеличение измеренной концентрации нейтрофилов из-за более высокой концентрации MNP у кошек.
(б) Из-за этого сдвига меньшее количество нейтрофилов мигрирует в ткани, и, таким образом, продолжительность жизни нейтрофилов в крови увеличивается. Более старые нейтрофилы могут стать гиперсегментированными (сдвиг вправо).
(2) Снижается апоптоз зрелых нейтрофилов, что способствует длительному выживанию в кровотоке и, следовательно, нейтрофилии.
(3) Сокращается время прохождения через костный мозг для созревания и незначительно увеличивается высвобождение нейтрофилов из костного мозга. Высвобождаются в основном сегментоядерные нейтрофилы, но глюкокортикоиды могут вызывать высвобождение сегментоядерных нейтрофилов и, следовательно, незначительный сдвиг влево (обычно < 1000/мкл, но при уже существующем воспалении может быть и больше).
б. Классические стероидные лейкограммы чаще всего встречаются у собак и включают нейтрофилию (2–4× URL (Верхний контрольный предел)) с небольшим или отсутствующим сдвигом влево (палочкоядерные нейтрофилы < 1000/мкл), лимфопению, моноцитоз и эозинопению или низконормальные эозинофилы. Воспаление может вызывать идентичную картину, но наличие токсичных нейтрофилов будет поддерживать воспаление. Интенсивность нейтрофилии варьирует в зависимости от глюкокортикоидов и дозировок; у собак, получавших противовоспалительные дозы преднизолона (1 мг/кг каждые 24 часа), наблюдались лишь незначительные изменения лейкограммы (редко вне референтных доз) через 7 и 14 дней лечения. Влияние на кинетику нейтрофилов уменьшается при хроническом повышении уровня глюкокортикоидов (например, при гиперадренокортицизме).

6. Повышение уровня катехоламинов (физиологическая нейтрофилия)
а. Эта нейтрофилия возникает в результате воздействия катехоламинов (обычно связанных со страхом, возбуждением и физической нагрузкой), которые вызывают сдвиг от MNP (Пула пристеночных нейтрофилов), включая селезенку и легкие, к CNP (Пулу циркулирующих нейтрофилов) (рис. 2.8, Е). Этот сдвиг связан с увеличением скорости кровотока, особенно при выведении нейтрофилов из легких. Также может снижаться адгезия нейтрофилов к эндотелиальным клеткам.
б. Уровень нейтрофилии может быть примерно в два раза выше крови собак, лошадей и крупного рогатого скота, и потенциально в 3-4 раза выше у кошек, из-за более высокого MNP у них.
c. Чаще всего это наблюдается у здоровых животных, в основном у кошек. Концентрация лейкоцитов относительно быстро возвращается к норме (в течение часа), если раздражитель исчезает.
d. Поскольку увеличение скорости кровотока изменяет кинетику других лейкоцитов, также могут повышаться концентрации других лейкоцитов, особенно лимфоцитов, которые, как правило, являются другим наиболее многочисленным типом лейкоцитов в крови.

7. Хронический миелоидный лейкоз и хронический нейтрофильный лейкоз (таблица 6.5)
а. При этих лейкозах нейтрофилия обусловлена клональной пролиферацией нейтрофилов, достаточно дифференцированных, чтобы их можно было классифицировать как нейтрофилы; эти состояния трудно отличить от неопухолевой нейтрофилии. Может наблюдаться выраженный лейкоцитоз со сдвигом формулы влево, более выраженным в костном мозге.
б. При остром миелоидном лейкозе клетки включают множество незрелых предшественников гранулоцитов, которые не классифицируются как нейтрофилы в лейкограмме.

8. Новообразования, вызывающие паранеопластическую нейтрофилию
а) Опухолевые ткани могут продуцировать G-CSF, GM-CSF, IL-6 или аналогичное вещество, стимулирующее нейтропоэз. Эта прямая стимуляция нейтропоэза отличается от стимуляции, вызванной воспалением, вторичным по отношению к новообразованию. Концентрация нейтрофилов в крови может напоминать либо воспалительную нейтрофилию (различные степени сдвига влево, которые могут сопровождаться моноцитозом), либо хронический лейкоз. Заключение о наличии паранеопластического лейкоцитоза, хотя и не является окончательным, чаще всего основывается на связи выраженного лейкоцитоза с новообразованием, исключении других причин лейкоцитоза и устранении лейкоцитоза путем удаления или медикаментозного лечения новообразования. Иммуногистохимия может предоставить доказательства продукции цитокинов (например, GM-CSF) опухолевыми клетками, а также может выявить повышенную экспрессию генов цитокинов в опухолевой ткани, хотя последнее не локализует выработку цитокинов в опухолевых клетках.
б. Новообразования у собак, ассоциированные с выраженным нейтрофильным лейкоцитозом, включают аденоматозные полипы прямой кишки, солидные карциномы почек и/или канальцев, новообразования легких, и метастатическую фибросаркому.
c. Новообразования у кошек, связанные с паранеопластической нейтрофилией, включают карциному молочной железы, плоскоклеточный рак и аденокарциному кожи.

9. LAD (Дефицит адгезии лейкоцитов) тип I
a. Тип I LAD выявлен у ирландских красно-белых сеттеров, ирландских сеттеров, собак смешанных пород, крупного рогатого скота голштинской породы и домашней длинношерстной кошки; эти заболевания называются собачий тип (CLAD), бычий тип (BLAD) и кошачий тип (FLAD). Они вызваны мутациями в гене субъединицы β2-интегрина, которые приводят к снижению экспрессии CD18 (субъединицы β2-интегрина). Дефект предотвращает образование функциональных гетеродимеров CD11/CD18, которые являются рецепторами молекул адгезии, необходимыми для прочного прикрепления и трансэндотелиальной миграции лейкоцитов.
б. У собак с CLAD наблюдается стойкая нейтрофилия, начинающаяся в щенячьем возрасте, и сопутствующая миелоидная гиперплазия костного мозга. Также могут наблюдаться моноцитоз и лимфоцитоз. Пораженные собаки имеют повышенную восприимчивость к инфекциям, поскольку лейкоциты не могут достичь очагов инфекции. До того, как был выявлен специфический дефект, это заболевание называлось синдромом собачьей гранулоцитопатии. У собак CLAD можно выявить с помощью ПЦР-анализа.
c. У крупного рогатого скота с BLAD наблюдается выраженная нейтрофилия и рецидивирующие инфекции. Для выявления пораженного крупного рогатого скота и значительного снижения заболеваемости BLAD были использованы методы ПЦР-анализа путем селекции.
d. У кастрированного самца домашней длинношерстной кошки с FLAD не было экспрессии CD18 в лейкоцитах, и у него была стойкая нейтрофилия (> 40 000/мкл), усугубленная рецидивирующими клиническими инфекциями; он прожил 7 лет.

10. LAD III типа: Сообщалось о случаях LAD III у немецкой овчарки и помеси немецкой овчарки и ротвейлера с одинаковой мутацией в гене kindlin-3, что приводит к дефекту или отсутствию белка kindlin-3 и нарушению функции лейкоцитов и интегринов тромбоцитов (рецепторов молекул адгезии). Kindlin-3 - это внутриклеточный белок, необходимый для того, чтобы лейкоциты и интегрины тромбоцитов претерпевали конформационные изменения, необходимые для высокоаффинного связывания и адгезии. У пораженных собак наблюдались стойкая нейтрофилия, моноцитоз и лимфоцитоз, сопровождавшиеся рецидивирующими инфекциями и кровоизлияниями на слизистых оболочках или в послеоперационном периоде. Эту мутацию можно диагностировать с помощью ПЦР-анализа.

11. Другие условия или неизвестные механизмы
a. Нейтрофилия, индуцированная фармакологически введением G-CSF (Гранулоцитарного колониестимулирующего фактора)
б. Нейтрофилия при токсикозе эстрогенами: Нейтрофилия возникает через 2-3 недели после инъекций эстрадиола.

Нейтропения это (измеренная концентрация нейтрофилов в крови ниже LRL (Нижнего контрольного предела)) (таблица 2.9)

1. Нейтропения — это снижение концентрации всех стадий нейтрофилов (общего числа нейтрофилов), а не только сегментоядерных. При снижении концентрации сегментоядерных нейтрофилов и повышении палочкоядерных нейтрофилов, объединенная концентрация сегментоядерных и палочкоядерных нейтрофилов может быть в пределах референтного интервала, и в этом случае нейтропении не будет. Однако могут наблюдаться и другие похожие нарушения.

2. Воспалительная нейтропения (рис. 2.9, Б)
a. Воспалительная нейтропения возникает, когда сужение сосудов или эмиграция нейтрофилов в воспаленную ткань превышает высвобождение нейтрофилов из костного мозга. Как правило, это происходит во время острого воспалительного заболевания, протекающего в тяжелой форме. Если это связано с эндотоксикозами, основной причиной может быть маргинализация нейтрофилов.
(1) Цитокины и хемоаттрактанты стимулируют выделение и эмиграцию большого количества нейтрофилов в воспаленную ткань. Это перемещение может начаться в течение нескольких минут после введения инфекционного агента. Цитокины (G-CSF, GM-CSF) также стимулируют повышенную выработку нейтрофилов, но в крови изменений, вызванных этой стимуляцией, не ожидается по крайней мере в течение 2 дней (могут произойти быстрее, чем в норме). Заменяются балансемокинами в большинстве случаев путем введения G-CSF или других факторов, способствующих быстрому выходу нейтрофилов, главным образом из NSP (Пул хранения нейтрофилов). При истощении NSP высвобождается больше клеток в NMP, и, таким образом, обычно наблюдается сдвиг влево. Однако сдвига влево может не быть даже при выделении клеток из NMP, поскольку общая измеренная концентрация нейтрофилов может быть настолько низкой, что концентрация нейтрофилов в полосе не может превышать URL. Если во время болезни исследовать костный мозг, то популяции клеток отражают изменения в лейкоцитах.:
(а) Ранний: истощение NSP ± снижение NMP Пул созревания нейтрофилов)
(b) 2-3 дня: увеличение NPP (Пул пролиферации нейтрофилов) без увеличения NMP
(c) 5-7 дней: миелоидная гиперплазия; увеличение NPP и NMP
(2) Воспалительная нейтропения часто встречается у взрослых особей крупного рогатого скота, поскольку у них относительно небольшой запас нейтрофилов. При повышенном спросе на нейтрофилы в запасе нейтрофилов их недостаточно для внезапного выброса, приводящего к нейтрофилезу. Кроме того, экспериментальные данные свидетельствуют о том, что после истощения резервного пула у крупного рогатого скота требуется больше времени для генерации нейтрофилов.
(а) Ожидаемая реакция на острый воспалительный процесс у взрослого крупного рогатого скота иллюстрируется последовательностью событий после введения Enterobacter aerogenes в молочные железы лактирующих коров.
(i) Начальная нейтропения (в течение 6 ч)
(ii) Значительный сдвиг влево (на 24 часа)
(iii) Снижение нейтропении (к 31 часу)
(iv) Нейтрофилы в пределах референтного интервала и стойкий сдвиг влево (на 72 ч)
(b) сохранение нейтропении в течение 3 дней наблюдается при более тяжелых инфекциях
(c) Тяжесть нейтропении обычно выше у крупного рогатого скота с бактериемическим маститом, чем у небактериального крупного рогатого скота с маститом.
b. Эндотоксическая нейтропения: Всякий раз, когда инфекция грамотрицательными микроорганизмами вызывает эндотоксикоз, эндотоксины инициируют изменения в лейкоцитах, которые могут вызвать нейтропению (рис. 2.9, В).
(1) Эта нейтропения возникает из-за того, что эндотоксины вызывают быстрый переход нейтрофилов из пула циркулирующих нейтрофилов в пул приставочных нейтрофилов, сдвиг, опосредованный индуцированным эндотоксином высвобождением медиаторов воспаления (например, TNF и IL-1), которые увеличивают экспрессию различных молекул адгезии на нейтрофилах и эндотелиальных клетках. Этот эффект сохраняется в течение 1-3 часов после однократного воздействия.
(2) К тому времени, когда ветеринар осмотрит животное с эндотоксикозом, нейтропения может уже не проявляться, поскольку:
(а) эндотоксины стимулируют высвобождение нейтрофилов из костного мозга примерно через 8-12 часов.
(б) эндотоксины стимулируют повышенную выработку нейтрофилов, что влияет на концентрацию нейтрофилов в крови примерно через 3-5 дней.
(c) Другие медиаторы воспаления могут одновременно изменять кинетику нейтрофилов.
(d) Одновременное эндогенное высвобождение адреналина или кортизола может способствовать повышению концентрации нейтрофилов.
(3) Большинство исследований изменений кинетики нейтрофилов, вызванных эндотоксинами, включали инъекции эндотоксинов. При спонтанных инфекциях, вероятно, другие факторы также влияют на движение нейтрофилов.

3. Нейтропения, вызванная разрушением зрелых нейтрофилов
a. Идиопатическая IMN (Иммуноопосредованная нейтропения) может в первую очередь поражать зрелые нейтрофилы или их предшественников (см. IMN, нацеленный на предшественников, ниже, в разделе 5b).
(1) Это заболевание наблюдается в основном у собак. Считается, что антинейтрофильные антитела связываются со зрелыми нейтрофилами, которые затем разрушаются мононуклеарной системой фагоцитов. Разрушение может происходить в костном мозге, печени и селезенке; у некоторых пораженных собак в этих органах наблюдается фагоцитоз зрелых нейтрофилов. У домашних млекопитающих причинные факторы не установлены, но иммуносупрессивная терапия обычно приводит к ремиссии.
(2) Диагноз обычно ставится на основании исключения, умеренных клинических признаков по сравнению с теми, которые ожидаются при нейтропении, вызванной сепсисом, стойкой нейтропении на фоне антимикробной терапии, стабильных результатов исследования костного мозга и очевидного ответа на иммуносупрессивную терапию. При исследовании зрелых нейтрофилов в костном мозге выявляется гранулоцитарная гиперплазия, часто с большим количеством полосчатых нейтрофилов, чем сегментоядерных.
б. Аллоиммунная неонатальная нейтропения
(1) Нейтропения возникает, когда новорожденный проглатывает молозиво и поглощает антинейтрофильные антитела матери, образующиеся к антигенам отцовского происхождения, отсутствующим в нейтрофилах матери, но присутствующим в нейтрофилах новорожденного. Эти антитела связывают нейтрофилы новорожденного и опосредуют разрушение нейтрофилов.
(2) Сообщалось об аллоиммунной неонатальной нейтропении у жеребят; диагноз был подтвержден исключением других причин стойкой нейтропении и результатами анализа агглютинации нейтрофилов или иммунофлуоресценции на антитела, в которых использовались контрольные образцы, но которые не были официально подтверждены или широко использовались с образцами лошадей.
c. Нейтропения при гемофагоцитарном синдроме: Нейтропения может быть одной из множественных цитопений, связанных с неселективным фагоцитозом гемических клеток неопухолевыми макрофагами, стимулируемыми цитокинами. Приобретенный гемофагоцитарный синдром может возникать вторично по отношению к различным воспалительным (в том числе иммуноопосредованным) или опухолевым заболеваниям. Хотя анемия и тромбоцитопения часто встречаются у собак с гемофагоцитарной гистиоцитарной саркомой, заболеванием, имеющим сходство с гемофагоцитарным синдромом, нейтропения таковой не является.
d. Нейтропения, связанная с лимфоцитозом гранулярных лимфоцитов костного мозга (опухолевых или неопухолевых): Активированные гранулярные лимфоциты (NK-клетки или Т-лимфоциты) усиливают экспрессию лиганда Fas, который может связываться со своим рецептором (Fas) на нейтрофилах, вызывая таким образом апоптоз и преждевременное разрушение нейтрофилов. Это может происходить в некоторых случаях идиопатической иммуноопосредованной нейтропении, и было предложено, что этот механизм способствовал нейтропении, возникающей через несколько недель после заражения вирусом иммунодефицита кошек, а также нейтропении, связанной с гранулезноклеточными лейкозами у людей. У собак нейтропения редко ассоциировалась с Т-клеточным гранулярным лимфолейкозом или лимфомой, поражающими костный мозг, но без лимфоцитоза в крови.

4. Нейтропения, вызванная гранулоцитарной или генерализованной гипоплазией костного мозга (нейтропения со сниженной продукцией) (рисунок 2.9D)
a. Гранулоцитарная гипоплазия или аплазия может возникать при повреждении стволовых клеток или клеток микроокружения костного мозга (см. главу 6). Может наблюдаться генерализованная или более избирательная гипоплазия, вызывающая снижение выработки нейтрофилов. Это может быть вызвано инфекциями, токсикантами (включая эндогенные эстрогены), облучением всего тела, миелофитией, иммуноопосредованными заболеваниями, включая бычью аллоиммунную неонатальную панцитопению, тяжелой недостаточностью питания с желатиновой трансформацией костного мозга или снижением уровня G-CSF, вызванным длительным лечением рекомбинантным человеческим G-CSF, который может индуцировать антитела, которые пересекаются с реагируйте с помощью собственного G-CSF собаки. Когда вызвано цитотоксическими химиотерапевтическими средствами, которые дополнительно повреждают предшественников нейтрофилов
для делящихся опухолевых клеток [нейтрофильный] надир обычно наступает через 7-10 дней после
администрация. Винкристин также может вызывать нейтропению в низких дозах, используемых для
лечение иммуноопосредованной тромбоцитопении; одновременная терапия циклоспорином увеличивает риск.
б. Эту причину нейтропении обычно отличают от других причин нейтропении по стойкой нейтропении (часто без сдвига влево, хотя вторичные инфекции могут вызывать сдвиги влево и токсические изменения) и результатам обследования костного мозга. Как правило, созревание в линии нейтрофильных клеток завершено, если нейтропоэз просто снижен, а не отсутствует. Поскольку заболевание может повреждать другие клеточные линии в костном мозге, концентрация других клеток крови (например, эритроцитов или тромбоцитов) может быть снижена. Лимфопении может и не быть, потому что лимфопоэз в других лимфоидных тканях может быть не нарушен, а кровь [лимфоцитарная система] очень зависит от рециркуляции лимфоцитов.

5. Нейтропения с неэффективной продукцией (нейтропения при неэффективном нейтропоэзе) (рис. 2.9, D)
а) Неэффективное продуцирование происходит при нескольких состояниях, при которых предшественники нейтрофилов погибают до высвобождения из костного мозга. Он характеризуется стойкой нейтропенией (с незначительным сдвигом влево или без него, если только сепсис не развивается вторично по отношению к нейтропении), сопровождающейся остановкой созревания миелоидов (заметным уменьшением количества клеток после достижения определенной стадии созревания) или выраженной миелоидной гиперплазией, если проблема затрагивает последние стадии созревания, включая их миграцию из костного мозга. Моноцитоз может наблюдаться из-за того, что GM‑CSF и G-CSF увеличивают количество клеток, дифференцирующихся в моноциты. Концентрация лимфоцитов обычно находится на уровне WRI.
b. IMN (иммуноопосредованная нейтроцитопения), нацеленная на прекурсоры: У некоторых собак с нейтропенией, реагирующей на глюкокортикоиды, и клиническим диагнозом IMN наблюдается задержка созревания миелоидов на ранней или средней стадии без выраженной гиперплазии нейтрофилов, сопровождающейся иммуноопосредованным разрушением зрелых нейтрофилов (раздел 3а выше). Это сопоставимо с результатами, полученными у некоторых собак с иммуноопосредованной анемией, вызванной предвестниками. У кошки с необъяснимой стойкой нейтропенией, которая, по-видимому, была устойчивой к иммунотерапии (и одновременному приему антибиотиков), было подозрение на первичную ИМН, вызванную предвестниками.
c. Цитопении, вызванные фенобарбиталом: Клинически значимая изолированная нейтропения, бицитопения или часто панцитопения возникают примерно у 5 % собак, получающих фенобарбитал для лечения судорог, обычно после нескольких месяцев лечения.
Нейтропения связана с миелоидной гиперплазией (неэффективным нейтропоэзом), часто со сдвигом влево и усилением фагоцитоза миелоидных клеток в костном мозге, и чаще всего проходит в течение 2-3 недель после прекращения приема фенобарбитала и перехода на другой противосудорожный препарат. Аналогичные изменения могут наблюдаться в эритроидной линии, а в некоторых случаях могут присутствовать диспластические клетки. Механизм цитопении неизвестен, но этому может способствовать разрушение клеток под действием иммунной системы.
d. Выраженный дефицит кобаламина: Редкие мутации в генах амниона или кубилина, двух белках, образующих кишечные (и почечные) рецепторы cubam, вызывают нарушение всасывания кобаламина в кишечнике, нарушение роста и неэффективность или снижение кроветворения с дисмиелопоэзом и дизэритропоэзом. Аналогичные мутации были зарегистрированы у нескольких пород собак, включая ризеншнауцеров, австралийских овчарок, бордер-колли, биглей и комондоров. Собаки быстро реагируют на парентеральное введение цианокобаламина. В костном мозге собаки были обнаружены популяции гранулоцитов, свидетельствующие о задержке созревания. Исследователи предположили, что это связано с тем, что G-CSF необходим для терминальной дифференцировки нейтрофилов, но лечение G-CSF не проводилось. Иммуносупрессивная терапия проводилась только в течение 4 дней, этого было недостаточно, чтобы исключить IMN, направленный на предшественников.
f. Миелодиспластические новообразования, сопровождающиеся нейтропоэзом, обычно характеризуются цитопенией с экспансией клеток-предшественников в костном мозге цитопенического ряда. Дифференциация этих новообразований от гиперпластических реакций может быть затруднена, но выраженная клеточная атипия (диспластические изменения) свидетельствует в пользу миелодиспластического новообразования.

6. Другие, неизвестные или множественные механизмы
а. Синдром захваченных нейтрофилов, наследственное аутосомно-рецессивное заболевание, сходное с синдромом Коэна у человека, встречается у бордер-колли с нейтропенией или низким содержанием нейтрофилов, микроцефалией, узким и удлиненным черепом, задержкой развития и вторичными инфекциями. Сообщалось о нейтрофильном полиартрите, реагирующем на глюкокортикоиды (который, как полагают, опосредован иммунитетом), у некоторых пораженных собак, а другие воспалительные поражения указывают на то, что большое количество нейтрофилов может достигать, по крайней мере, некоторых очагов воспаления, несмотря на стойкую нейтропению. У больных собак имеется мутация в гене 13B, отвечающем за сортировку вакуолярного белка (VPS13B), который участвует в гликозилировании, сортировке и транспортировке белков, но механизм, посредством которого мутация вызывает нейтропению, неизвестен. У пораженных собак наблюдается миелоидная гиперплазия с повышенной гибелью нейтрофилов и некоторыми признаками фагоцитоза нейтрофилов. Для подтверждения мутации может быть использован ПЦР-анализ.
b. Токсичность
(1) Нейтропения была связана с особыми реакциями на терапию зонисамидом у четырех собак с необъяснимой нейтропенией, которая прошла в течение от нескольких дней до 6 месяцев после прекращения приема противосудорожного препарата. Анализ костного мозга был проведен только у одной собаки и подтвердил наличие неэффективной миелоидной гиперплазии, а не гипоплазии; эта собака также получала фенобарбитал, который, как известно, вызывает нейтропению и неэффективную миелоидную гиперплазию, но нейтропения в конечном итоге прошла без прекращения приема фенобарбитала.
(2) Введение карбоната лития кошкам вызывало нейтропению и то, что было описано как задержка созревания с уменьшением количества зрелых нейтрофилов в костном мозге. Из отчета было неясно, были ли распространены ранние миелоидные стадии (что способствовало бы неэффективному нейтропоэзу) или же просто произошло истощение резервной системы.
(3) Повилика люцерны, вызванная употреблением в пищу травы Cuscuta campestris, вызывает нейтропению у лошадей, но причина неизвестна и может быть вторичной по отношению к колиту и сепсису.
c. Циклический гемопоэз
(1) Циклический гемопоэз у собак (циклическая нейтропения) серых колли, помесей серых колли и других собак
(а) Циклический гемопоэз у собак является редким аутосомно-рецессивным заболеванием у серых колли и их помесей, и о нем сообщалось у собак смешанных пород без фенотипа колли. Его диагностические признаки обусловлены примерно 2-недельными циклами выработки нейтрофилов, эритроцитов, тромбоцитов и моноцитов, что приводит к циклической нейтропении. Цикл выработки нейтрофилов не синхронизирован с другими циклами.
(б) Больные собаки восприимчивы к инфекциям из-за рецидивирующей нейтропении и обычно заболевают в возрасте до 6 месяцев. Анемия обычно протекает в легкой форме, поскольку продолжительность жизни эритроцитов больше, чем цикл их выработки. Может наблюдаться тромбоцитоз, и было описано нарушение функции тромбоцитов.
(c) это вызвано мутацией AP3B1, гена, кодирующего β-субъединицу связанного с адаптером белкового комплекса 3 (AP3), белка, участвующего во внутриклеточном переносе везикулярных белков. Нейтрофилы пораженных собак имеют пониженное содержание белка эластазы в первичных гранулах, сниженную активность эластазы и накопление белков-предшественников эластазы, находящийся вне их первичных гранул во время созревания, поддерживает нарушение обмена белками между органеллами. Кроме того, нарушение обмена белками в меланоцитах и тромбоцитах приводит к гипопигментации и нарушению функции тромбоцитов. Циклическая нейтропения человека вызвана мутациями в гене (ELANE), кодирующем эластазу нейтрофилов, и другие случаи врожденной нейтропении человека связаны с мутациями либо в ELANE, либо в AP3B1. Точные патогенезы циклического кроветворения и циклической нейтропении у собак остаются спорными.
(2) Циклический гемопоэз, связанный с инфекцией FeLV
d.  Введение G-CSF вызывает быстрое и временное снижение числа нейтрофилов, что может привести к нейтропении через 30 минут после введения с возвращением к исходному уровню через 60 минут. G-CSF связывается с рецепторами нейтрофилов и вызывает временную активацию CD18, тем самым опосредуя быструю маргинализацию нейтрофилов, в основном в легких и селезенке.
e.  Нейтропения при бабезиозе собак: Нейтропения, часто со сдвигом лейкоцитарной формулы влево и иногда с токсическими изменениями, сопровождает гемолитическую анемию и, как правило, тромбоцитопению, по крайней мере, у умеренного процента собак с инфекциями, вызванными Babesia canis (особенно B. canis canis). Сдвиг лейкоцитарной формулы влево и токсические изменения свидетельствуют о воспалении, но причина нейтропении может быть многофакторной. Примечательно, что заболевание не ассоциировано с нейтрофилией, часто встречающейся у собак с иммуноопосредованной гемолитической анемией.
7. Лейкоциты, нейтрофилы и лимфоциты у борзых и здоровых североамериканских бельгийских тервюренов могут быть ниже, чем у других пород, а результаты для [WBC] могут быть столь же низкими у уиппетов. Напротив, эти значения у бельгийских тервюренов в Бельгии были сопоставимы с другими породами, хотя уровень лейкоцитов уменьшался с возрастом.

а) Лимфоцитоз может наблюдаться при подостром или хроническом воспалении, но чаще всего он отсутствует при хронических воспалительных состояниях. Если он присутствует, это вызвано усилением лимфопоэза в ответ на хроническую антигенную или цитокиновую стимуляцию. Могут присутствовать реактивные лимфоциты. Причины включают инфекции, вызванные определенными бактериями (например, Ehrlichia canis), грибками, паразитами или вирусами (например, FeLV, BLV), а также иммуноопосредованные заболевания (например, иммуноопосредованная гемолитическая анемия у кошек). Значительный неопухолевый лимфоцитоз спорадически возникает при различных инфекционных и неинфекционных воспалительных заболеваниях у кошек.
б. При хронических воспалительных заболеваниях лимфоцитоз является частью гиперпластической лимфоидной системы. Возможно одновременное увеличение лимфатических узлов или лимфоидная гиперплазия в других тканях.
c. Лимфоцитоз обычно бывает легким или умеренным (2-3× URL (Верхний контрольный предел)), но иногда выраженным (>30,0 ×103/мкл у собак, кошек или крупного рогатого скота). При умеренном или выраженном течении для выявления признаков лимфолейкоза могут быть использованы иммунофенотипирование и PARR.
d. Сопутствующие отклонения в лейкограмме обычно включают нейтрофилию (зрелую, возможно, со сдвигом вправо или влево) и/или моноцитоз, а иногда эозинофилию и/или базофилию.

2. Повышенное содержание катехоламинов вызывает физиологический (сдвиговый) лимфоцитоз (рис. 2.10,В).
а) Этот лимфоцитоз вызван перемещением лимфоцитов из пула пристеночных лимфоцитов в пул циркулирующий (особенно из селезенки), чему способствуют физические нагрузки или экзогенные или эндогенные катехоламины. Сдвиг лимфоцитов, вероятно, опосредован увеличением скорости кровотока, снижением адгезии лимфоцитов к эндотелию и сокращением селезенки.
б. Величина лимфоцитоза может достигать друхкратного превышения верхнего контрольного предела, и лимфоцитоз обычно длится от нескольких минут до нескольких часов.
c. Морфологических изменений в лимфоцитах не ожидается, за исключением потенциального увеличения количества гранулярных лимфоцитов. Это объясняется тем, что катехоламины, по-видимому, преимущественно демаргинируют цитотоксические Т- и NK-лимфоциты, связываясь с их высокоаффинными β2-адренорецепторами и снижая их адгезию к эндотелиальным клеткам. Сообщалось о повышении концентрации NK-клеток у телят, подвергшихся транспортному стрессу.
d. Как и при сдвиговой нейтрофилии, сдвиговый лимфоцитоз чаще всего наблюдается у кошек, молодых лошадей и здоровых животных.

3. Лимфопролиферативные неоплазии (таблица 6.5 и рисунок 2.10D)
а. Этот лимфоцитоз обычно вызван неопластической пролиферацией лимфоидных клеток в лимфатических узлах, костном мозге или других тканях.
b. Известно, что вирусы BLV и FeLV вызывают неопластическую трансформацию лимфоцитов, но не все лимфоидные новообразования у кошек и крупного рогатого скота вызваны этими вирусами. Причины лимфоидных новообразований у других домашних млекопитающих неизвестны.
c. У домашних млекопитающих лимфоидные лейкозы могут возникать в селезенке или костном мозге, или же они могут представлять собой лейкозные проявления лимфомы, т. е. новообразование возникает в лимфатических узлах или других лимфоидных тканях за пределами костного мозга и распространяется в костный мозг и кровь.
d. Лейкоз часто не распознается до тех пор, пока не появится выраженный или экстремальный лимфоцитоз, но повышение уровня лимфоцитов начинается как незначительное и прогрессирует. При некоторых лимфоидных лейкозах лимфоциты имеют аномальные или «незрелые» морфологические признаки (острые лейкозы), в то время как при других они выглядят индивидуально, подобно клеткам, наблюдаемым в норме, но слишком многочисленны или монотипичны (хронические лимфоцитарные лейкозы). Диагностика лейкоза проще всего, когда клетки атипичны и многочисленны; однако для подтверждения линии лимфоцитов могут потребоваться специальные исследования. При отсутствии выраженной атипии лимфоцитов для диагностики хронического лимфоцитарного лейкоза может потребоваться исключение других заболеваний и подтверждение клональности.

4. BLV-инфекция, вызывающая стойкий лимфоцитоз крупного рогатого скота: BLV-инфекция может вызывать умеренный или выраженный стойкий поликлональный В-клеточный лимфоцитоз; патогенез, по-видимому, связан со снижением апоптоза (повышенной выживаемостью) инфицированных вирусом В-лимфоцитов в сочетании с изменением функции Т-лимфоцитов и пролиферацией неинфицированных В-лимфоцитов. У части крупного рогатого скота с персистирующим лимфоцитозом, вызванным BLV, развивается клональная пролиферация лимфоцитов (новообразования). У овец также развивается лимфоцитоз в результате заражения BLV, но он может быть более прогрессирующим из-за различных эффектов вируса.

5. Идиопатический поликлональный В-клеточный лимфоцитоз у английских бульдогов (в основном): Этот синдром характеризуется умеренным или выраженным лимфоцитозом (медиана = 22 000/мкл) малых и средних В-лимфоцитов, отсутствием явной атипии и обычно ассоциируется с поликлональной или олигоклональной гиперглобулинемией IgA ± IgM.132 Результаты рутинного и расширенного PARR не подтвердили клональность. Обычно наблюдаются спленомегалия или образования в селезенке, а в двух случаях, о которых сообщалось, наблюдался лимфоцитоз костного мозга (20-40 % лимфоцитов). Несмотря на отсутствие признаков опухолевой пролиферации у этих собак, лимфоциты могут подвергаться злокачественной трансформации. Редко у собак других пород наблюдалась подобная совокупность признаков.

6. Лимфоцитоз при гипоадренокортицизме (болезнь Аддисона)
а) Этот лимфоцитоз может быть вызван отсутствием глюкокортикоидных гормонов, которые обычно подавляют выработку лимфоцитов или изменяют распределение лимфоцитов в организме.
б. Хотя у собак с гипоадренокортицизмом может наблюдаться лимфоцитоз, у многих его нет. Всегда думайте о гипоадренокортицизме, если у собаки с явным стрессом наблюдается нейтропения и лимфоцитоз (стресс должен вызывать обратное, т.е. нейтрофилию и лимфопению), особенно у собак с азотемией и когда уровень [эозинофилов] близок к норме или повышен.
в. Классическая лейкограмма при гипоадренокортицизме у собак состоит из показателей: низкая-нормальная концентрация нейтрофилов, высокая - нормальная концентрация лимфоцитов, повышенная - моноцитов и высокая- нормальная концентрация эозинофилов. Однако возможны вариации, и может наблюдаться умеренная нейтрофилия.

7. Сообщалось о случаях Т-клеточного лимфоцитоза, связанного с тимомой, у собак. Лимфоцитоз носит поликлональный характер и проходит после тимэктомии (когда тимэктомия возможна). Лимфоциты не имеют явной атипии и могут накапливаться в крови из-за нарушения регуляции выработки (перепроизводства), повышенного выхода из тимуса или изменения транспорта.

8. LAD (Дефицит адгезии лейкоцитов): у некоторых собак с LAD типа I и типа III лимфоцитоз сопровождается нейтрофилией и моноцитозом (см. раздел о нейтрофилии).

9. У молодых животных в постнатальном периоде может наблюдаться лимфоцитоз, если сравнить результаты с результатами референтными интервалами (RIS) у взрослых.
а. Хотя концентрация лимфоцитов в первые несколько месяцев жизни, как правило, ниже, чем в зрелом возрасте, ее значения обычно достигают максимума в возрасте нескольких месяцев, а затем снижаются. Поэтому, например, у 3-месячного котенка или у детеныша верблюда может наблюдаться лимфоцитоз, если для сравнения использовать взрослые RIS. У собак [количество лимфоцитов] уменьшается примерно на 800/мкл в течение первых 2-4 лет жизни; с возрастом оно может продолжать незначительно снижаться. Концентрация лимфоцитов у жеребят, как правило, повышалась в течение первых 3 месяцев жизни и достигала значений, приближенных к обычным показателям для взрослых; с возрастом, по-видимому, наблюдается умеренное снижение количества [лимфоцитов]. Концентрация лимфоцитов у крупного рогатого скота увеличивается примерно до 1-летнего возраста, а затем постепенно снижается у взрослых.
б. По сравнению с RIS у взрослых, выраженный лимфоцитоз может достигать 2× 100.

10. В гематологических исследованиях крупного рогатого скота широко использовались данные, полученные от крупного рогатого скота, инфицированного BLV. Следовательно, показатели концентрации лимфоцитов, как правило, слишком высоки для неинфицированного, здорового крупного рогатого скота, и лимфоцитоз недостаточно изучен.

a. Причинами острой воспалительной лимфопении могут быть снижение лимфопоэза и следующие изменения в кинетике лимфоцитов, стимулируемые медиаторами острого воспаления:
(1) Повышенная концентрация и эмиграция лимфоцитов в воспаленные ткани
(2) Возвращение лимфоцитов в лимфатические узлы за счет увеличения скорости миграции через посткапиллярные клетки высоких эндотелиальных венул.
(3) Снижение скорости выхода лимфоцитов из лимфатических узлов по эфферентным лимфатическим сосудам
(4) Апоптоз лимфоцитов, связанный с изменением концентрации цитокинов, особенно при сепсисе или тяжелом заболевании
b. На большинстве острых воспалительных лейкограмм с нейтрофилией или нейтропенией также обнаруживается лимфопения. Исчезновение лимфопении обычно считается хорошим прогностическим признаком.
c. Обычно считается, что лимфопения вызвана стрессом, связанным с острым воспалением, а не самим воспалительным процессом. Стресс, вызванный болезнью, может вызывать или не вызывать лимфопению.
d. Истощение лимфоцитов играет определенную роль в острой воспалительной лимфопении, вызываемой определенными вирусами, например, вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота, вирусом собачьей чумы, парвовирусом, коронавирусами, вирусом иммунодефицита кошек, вирусом панлейкопении кошек, вирусом инфекционного перитонита кошек и тяжелой лихорадкой с синдромом тромбоцитопении.

Типичные причины такие же, как и при стероидной нейтрофилии. Лимфопения вызвана изменениями в кинетике лимфоцитов, вызванными эндогенными или экзогенными глюкокортикоидами. Тяжесть и продолжительность лимфопении, как правило, пропорциональны дозе и продолжительности повышенного приема глюкокортикоидов.
a. Лимфоциты перемещаются из пула циркулирующих лимфоцитов в другие пулы. Как только действие глюкокортикоидов ослабевает, лимфоциты возвращаются в кровь. В некоторых сообщениях указывается, что лимфопения вызвана снижением оттока лимфоцитов из лимфатических узлов, тогда как другие данные указывают на их перераспределение в костный мозг.
b. Лимфотоксические эффекты могут вызывать гипоплазию лимфоидной системы и, следовательно, снижение лимфопоэза, особенно при высоких концентрациях глюкокортикоидов. Чувствительность лимфоцитов к индуцированному глюкокортикоидами апоптозу различна, и, вероятно, существуют видовые различия. Степень, в которой апоптоз способствует индуцированной стероидами лимфопении у домашних млекопитающих, неясна.

эта лимфопения возникает в результате потери лимфоцитов в организме или их разрушения в организме.
а. Потеря богатой лимфоцитами лимфы может произойти при лимфангиэктазии или из-за неполной циркуляции лимфоцитов (например, при повторном удалении хилоторакальной жидкости у кошки). Нарушения, вызывающие эту лимфопению, встречаются нечасто.
b. Лимфоциты могут быть разрушены цитотоксическими препаратами, облучением или определенными вирусами (например, вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота, чумкой собак и вирусами парвовируса, вирусом иммунодефицита кошек), что приводит к истощению лимфоцитов в определенных тканях и крови.

Эта лимфопения вызвана врожденной лимфоидной гипоплазией или аплазией, которая снижает выработку лимфоцитов и способствует развитию инфекций. Лимфопения может быть легкой или выраженной. Поскольку большинство лимфоцитов крови являются Т-лимфоцитами, селективная аплазия Т-лимфоцитов вызывает более тяжелую лимфопению, чем селективная аплазия В-лимфоцитов.
a. Умеренная или тяжелая лимфопения возникает у лошадей и собак с различными формами тяжелого врожденного комбинированного иммунодефицита (SCID).
b. Стойкая или перемежающаяся лимфопения с выраженной В-клеточной лимфопенией возникает у лошадей с распространенным вариабельным иммунодефицитом.
c. Легкая лимфопения со снижением уровня В-лимфоцитов развивается через 3 недели после рождения у некоторых жеребят породы Фелл и Дейл пони с анемией/синдромом иммунодефицита (синдром Фелл пони); концентрация лимфоцитов у них с возрастом не увеличивается, как ожидалось. Другими признаками синдрома являются тяжелая анемия, гипоплазия тимуса, отсутствие плазматических клеток, неспособность продуцировать IgM и, возможно, IgG (присутствует колостральный IgG), оппортунистические инфекции и смерть примерно через 3 месяца.

Лимфопения часто встречается у животных с лимфомой. Лимфопения может быть вызвана снижением выработки (повреждением лимфатических узлов) или изменением кинетики лимфоцитов (нарушением циркуляции).

в Северной Америке, но не в Бельгии, может быть ниже, чем у других пород.

1. Воспалительный моноцитоз: Острые и хронические инфекционные или неинфекционные воспалительные заболевания могут вызывать моноцитоз за счет цитокиновой стимуляции выработки и высвобождения моноцитов. По-видимому, созревание и высвобождение моноцитов из костного мозга может быть заметно ускорено воспалением, при этом новообразованные моноциты попадают в кровь в течение нескольких часов после введения эндотоксина. Хотя обычно утверждается обратное, моноцитоз не указывает на хронический характер воспаления. Моноцитоз обычно отражает потребность в макрофагах в пораженной ткани или крови (например, при некрозе, кровоизлиянии, гранулематозном воспалении).

2. Повышенное содержание глюкокортикоидов, вызывающих стероидный (“стрессовый”) моноцитоз: Глюкокортикоидные гормоны или лекарственные препараты являются распространенной причиной моноцитоза у собак и могут способствовать умеренному моноцитозу у кошек; у лошадей и крупного рогатого скота они вызывают минимальные изменения или вообще не вызывают их. Причины те же, что и при стероидной нейтрофилии или лимфопении. Моноцитоз, вероятно, вызван перемещением моноцитов из изолированного пула в циркулирующий.

3. Моноцитарный лейкоз: При постановке диагноза он обычно характеризуется выраженным моноцитозом. Моноциты могут казаться аномальными или относительно нормальными, но, будучи атипичными и незрелыми, они, вероятно, не будут отнесены к категории моноцитов.

4. Моноцитоз, вторичный по отношению к IMN (Иммуноопосредованной нейтропении): Поскольку нейтрофилы и моноциты имеют общую бипотенциальную стволовую клетку, моноцитопоэз может усиливаться из-за усиления стимуляции цитокинами при неэффективном нейтропоэзе.

5. Циклический гемопоэз: Во время нейтропенических циклов может наблюдаться умеренный моноцитоз, который свидетельствует о повышении концентрации нейтрофилов в крови.

6. LAD(Дефицит адгезии лейкоцитов): Моноцитоз сопровождает нейтрофилию и лимфоцитоз у некоторых собак с LAD I и III типов (см. раздел "нейтрофилия").

7. G-CSF(Гранулоцитарный колониестимулирующий фактор): Его можно вводить для стимуляции нейтропоэза, но он также стимулирует моноцитопоэз.

Это трудно задокументировать, поскольку у здоровых домашних млекопитающих может быть относительно мало моноцитов в крови; уровень LRL, о котором сообщается, часто составляет 0/мкл, а у разных видов достигает 200/мкл. Моноцитопения не считается диагностической проблемой. Однако эндотоксемия может быстро привести к снижению количества моноцитов в крови или вызвать моноцитопению, поскольку моноциты быстро удаляются или мигрируют в места воспаления.

Термин "эозинофилия" также используется для описания увеличения количества эозинофилов в других тканях или промывных жидкостях).

1. Эозинофилия может быть преходящей (проявляться при однократном проведении ОАК) или стойкой (проявляться при повторных ОАК) и ассоциироваться со многими различными органами и нарушениями, часто с нарушениями, затрагивающими легкие, кожу или желудочно-кишечный тракт. Причины эозинофилии могут быть неясны, особенно в случае преходящих эозинофилий, но многие стойкие эозинофилии вызваны аллергическими заболеваниями, паразитами, обитающими во внесосудистых тканях, инфекциями или новообразованиями (таблица 2.13). В одном исследовании у ~20 % собак с концентрацией эозинофилов ≥ 1500/мкл были новообразования, часто из лимфоцитов или тучных клеток, но могли быть задействованы и другие факторы. (Примечание: Хотя в этом исследовании считалось, что уровень выраженной эозинофилии составляет ≥ 1500/мкл, некоторые лабораторные ссылки на собачью [эозинофилию] имеют этот показатель или больше.)

а. При нарушениях гиперчувствительности обычно наблюдаются клинические признаки, связанные с пораженными тканями, например, зуд при укусе блохи или стафилококковый дерматит, проблемы с дыханием при аллергическом бронхите.
b. Когда эозинофилия вызвана паразитарной инфекцией, это, скорее всего, реакция на паразита (взрослую особь или личинку) во внесосудистых тканях, а не в просвете кишечника. Эктопаразиты (например, блохи) или эндопаразиты могут вызывать эозинофилию. Эндопаразитами чаще всего являются филяриды, нематоды и трематоды, но некоторые простейшие инфекции, такие как саркоцистоз и токсоплазмоз, также могут вызывать эозинофилию. Ожидается, что большинство микроорганизмов, которые инфицируют клетки крови (например, гемотропная микоплазма, бабезия и цитомегаловирус), не вызывают эозинофилию, хотя, как сообщается, эозинофилия была наиболее распространенной гематологической патологией в одном исследовании у собак, инфицированных Hepatozoon canis (данные и RIs не были представлены).
c. Pythium insidiosum, грибоподобный оомицет, образующий гифы, поражает млекопитающих (например, собак, лошадей) и вызывает желудочно-кишечный или кожный/подкожный пиелонефрит. Часто встречается эозинофилия.
d. Эозинофилия ассоциируется с воспалением в различных тканях, богатых тучными клетками, хотя установить прямую причинно-следственную связь может быть сложно.
e. Эозинофилия, или, чаще, высокая концентрация эозинофилов, превышающая норму, обнаруживается у некоторых собак с гипоадренокортицизмом. В одном исследовании эозинофилия наблюдалась у большего процента собак пиренейских горных собак (38 %), чем у собак других пород (14 %) с гипоадренокортицизмом. Патогенез, вероятно, связан со снижением уровня кортизола.
f. Некоторые идиопатические эозинофильные состояния, связанные с эозинофилией, обычно вызывают клинические признаки, связанные с пораженными тканями (таблица 2.13).
g. Идиопатический гиперэозинофильный синдром иногда встречается у кошек, собак и лошадей. Ротвейлеры, по-видимому, к этому предрасположены. Синдром характеризуется стойкой и часто выраженной эозинофилией неустановленной причины (реактивной или опухолевой), связанной с эозинофильной инфильтрацией множества органов, часто вызывающей дисфункцию органов. Клиническое прогрессирование может исключать неопластический процесс.

Эозинофилия
3. Хронический эозинофильный лейкоз (таблица 6.5): Эта форма миелопролиферативного новообразования встречается очень редко. У кошек она связана с ретровирусной инфекцией. Окончательная дифференциация от неопухолевой эозинофилии обычно невозможна, особенно при первых проявлениях. Признаки, повышающие вероятность развития лейкоза, включают увеличение количества миелобластов в крови или костном мозге, диспластические изменения в эозинофилах или других гемоцитах, цитопении и персистенцию эозинофилии.

4. Другие миелоидные или лимфоидные новообразования, связанные с эозинофилией, включают другие миелопролиферативные новообразования, миелодиспластические/миелопролиферативные новообразования, острые миелоидные лейкозы и острые лимфоидные лейкозы.

5. Эозинофилию можно не заметить с помощью автоматического или микроскопического определения лейкоцитов у пациентов с аномальными гранулами эозинофилов (см. Не окрашивающиеся гранулы эозинофилов (серые эозинофилы) у собак).

1. Сама по себе эозинопения не имеет большого диагностического значения. Однако эозинопения может быть частью воспалительной или глюкокортикоидной лейкограммы или проявляться снижением выработки глюкокортикоидов при генерализованном поражении костного мозга (таблица 2.14).
2. Поскольку концентрация эозинофилов у здоровых животных, как правило, низкая, а рассчитанная концентрация эозинофилов в сыворотке крови может быть неточной, результаты анализа крови на эозинопению могут на самом деле не отражать патологическое состояние. Кроме того, референсные интервалы для определения концентрации эозинофилов у многих видов имеет значение 0/мкл в качестве нижнего контрольного предела, поэтому эозинопения не может быть обнаружена.

Понимание молекулярных и клеточных механизмов эозинофильного воспаления открыло путь к новым терапевтическим вмешательствам, которые могут изменить медицинское обслуживание пациентов с эозинофильным воспалением. Глюкокортикоиды являются основой терапии и действуют путем дестабилизации мРНК эотаксина, подавления транскрипции генов IL - 4, IL - 5 и эотаксина, а также подавляет выживание эозинофилов. Однако не все пациенты реагируют или поддерживают реакцию на глюкокортикоиды, возможно, из-за потери рецепторов или изменений в регуляторных белках. Другие подходы включают снижение продукции эозинофилов с помощью миелосупрессивных препаратов, таких как гидроксимочевина, ингибирование дегрануляции эозинофилов и эффекторных функций с помощью IFN - α и вмешательство в транскрипцию цитокинов, таких как IL - 5 и GM - CSF, с помощью циклоспорина А. Новые подходы включают антитела против IL - 5; антагонисты к лейкотриены, такие как цистеиниллейкотриены, или их рецепторы; ингибиторы тирозинкиназы, такие как иматиниб, которые могут быть эффективны у пациентов с ГЭК, вызванным конститутивной продукцией тирозинкиназ; лидокаин, который, как недавно было продемонстрировано, сокращает выживаемость эозинофилов; антигистаминные препараты третьего поколения; блокаторы адгезии эозинофилов; ингибиторы пути эотаксин/CCR3; антитела против человеческого IL - 13; и индукция апоптоза эозинофилов путем сшивания антител Siglec - 8.

A. Гематологические анализаторы ненадёжно определяют базофилы; повышение их количества может быть пропущено при их наличии или может быть зафиксировано при их отсутствии. Кроме того, базофилы у собак и кошек часто ошибочно определяются при микроскопии.

B. Базофилия (повышенная концентрация базофилов в крови, но этот термин также используется для обозначения повышенного содержания базофилов в других тканях или жидкостях или, в другом контексте, окрашивания основными красителями)

1. Только значительное увеличение или стойкое умеренное повышение концентрации базофилов выше 200-300/мкл следует считать окончательной базофилией из-за неточности дифференциального подсчета лейкоцитов, особенно когда речь идет о меньшинстве клеточной популяции. Однако, поскольку у здоровых особей присутствует так мало базофилов, необнаруженное увеличение количества [базофилов] может наблюдаться и без зарегистрированной базофилии.
2. Причина базофилии может быть неочевидной. Базофилия связана с аллергическими, паразитарными и неопластическими (включая паранеопластические) состояниями (таблица 2.15) и часто сопровождается эозинофилией.

С. Базопения (снижение концентрации базофилов в крови): Это не может быть подтверждено стандартными дифференциальными анализами лейкоцитов, поскольку концентрация базофилов у домашних млекопитающих, как правило, очень низкая (нижний контрольный предел составляет 0/мкл). Известно, что базопения не является клинически значимой.

1. Считается, что обнаружение одной тучной клетки в мазке крови или в препарате "buffy coat" домашних млекопитающих указывает на наличие мастоцитемии. Термин "мастоцитемия" предпочтительнее, чем "мастоцитоз", поскольку мастоцитоз может относиться к увеличению количества тучных клеток в тканях, отличных от крови. Любой из этих терминов может относиться к опухолевым или неопухолевым популяциям тучных клеток.

2. Заболевания, которые могут вызывать мастоцитемию (таблица 2.16)
a. Кожные и подкожные мастоцитомы, которые являются распространенными новообразованиями у собак, могут распространяться на кровь и органы кроветворения. То же самое относится к слизистым и висцеральным формам.
b. У собак зарегистрировано несколько случаев неопухолевой мастоцитемии (таблица 2.16). Большинство таких заболеваний связано с острыми воспалительными заболеваниями.
c. Тучноклеточные лейкозы встречаются редко; при их наличии тучные клетки многочисленны в костном мозге и крови, но могут также инфильтрировать другие ткани.
d. Мастоцитемия у кошек встречается редко. При наличии она обычно связана с висцеральными тучноклеточными новообразованиями, но была зарегистрирована у кошек без признаков тучноклеточных новообразований и с диагнозами лимфома или метастатическая гемангиосаркома.

3. В некоторых статьях, описывающих животных с мастоцитемией, указывается количество тучных клеток, обнаруженных в мазке крови. Это количество следует считать описательным, а не количественным, поскольку количество исследованной крови непостоянно или неизвестно.

B. Поскольку в крови здоровых домашних млекопитающих не ожидается наличия тучных клеток, снижения их концентрации не происходит.

Изменения концентрации лейкоцитов в крови часто происходят по схеме, приведенной в таблице 2.17. Распознавание картины лейкограммы помогает понять, чем болеет животное. Распознавание паттернов глюкокортикоидного и физиологического лейкоцитоза снижает вероятность неправильного толкования данных как признаков воспалительного заболевания. Однако не все расстройства проявляются классическими паттернами, параллельные процессы могут усложнять паттерны, а некоторые паттерны значительно перекрываются. Все результаты лейкограммы могут быть ошибочными даже в том случае, если у животного есть воспалительное или даже инфекционное заболевание. Характерные черты большинства моделей наблюдаются у всех домашних млекопитающих, но существуют значительные видовые различия.

A. Собаки
1. 2. Как правило, у собак наиболее выражен острый воспалительный лейкоцитоз. Классический глюкокортикоидный (стероидный или “стрессовый”) синдром, вероятно, наиболее распространен у собак.
B. Кошки
1. Более высокое соотношение MNP:CNP (Пул пристеночных нейтрофилов/Пул циркулирующих нейтрофилов) плюс их реакция "дерись или убегай" делают кошек более склонными к физиологическому лейкоцитозу. Инфекции, вызванные вирусом FeLV, могут привести к изменению концентрации клеток и внешнего вида.

A. Токсические нейтрофилы не указывают на токсемию или воздействие токсичного вещества, как может показаться из названия, а представляют собой нейтрофилы с дефектами созревания, вызванными быстрым нейтропоэзом вследствие воспаления или введения G-CSF. Они могут быть особенно полезны для распознавания, когда изменения лейкограммы не являются явными признаками воспаления; это включает в себя случаи, когда результаты анализа лейкоцитов и дифференциальной лейкоцитарной формулы (WRI, В пределах референтного интервала) или нейтрофилы и паттерны, которые могут отражать либо воспаление, либо реакцию на глюкокортикоиды или катехоламины. Они могут появиться в крови в течение 3 часов после воспалительного стимула.

1. Следующие так называемые токсические изменения, которые определяют токсичные нейтрофилы (рисунок 2.12), возникают в костном мозге или в месте экстрамедуллярного кроветворения.
а. Пенистая цитоплазма – это просветление цитоплазмы из-за диспергированных органелл. Это явление часто называют вакуолизацией, но его не следует путать с дискретными вакуолями, которые образуются в нейтрофилах, подвергшихся воздействию ЭДТА в течение нескольких часов.
б. Диффузная цитоплазматическая базофилия – это сохранение или персистенция цитоплазматической РНК во время созревания. Если цитоплазматическая базофилия наблюдается только у несегментированных нейтрофилов, это может отражать незрелость клетки и не быть токсическим изменением.
в. Цитоплазматические тельца Деле (очаговая цитоплазматическая базофилия) – это нерегулярные, округлые или угловатые, сине-серые цитоплазматические структуры, представляющие собой агрегаты гранулярного эндоплазматического ретикулума, содержащие РНК.
г. Асинхронное созревание ядер характеризуется наличием мелкозернистых, бледных, широких долей (что свидетельствует о незрелости), разделенных филаментами или выраженными углублениями (что свидетельствует о зрелости). Критерии классификации нейтрофилов как палочкоядерных или сегментоядерных основаны на синхронном созревании; эти критерии трудно применить к токсичным нейтрофилам.
e. Гигантские нейтрофилы – это более крупные сегментоядерные или палочкоядерные нейтрофилы, которые высвобождаются из костного мозга в результате асинхронного клеточного созревания, вероятно, из-за пропуска митозов в ядре ядерной пластинки (NPP). Некоторые из них, по-видимому, содержат вдвое больше ядерного материала, чем обычно, иногда с двумя отдельными ядрами. Чаще всего они встречаются у кошек. У лошадей они появляются в крови через 36 часов после введения эндотоксина, и многие из них были зарегистрированы через 48–72 часа. Если не сопровождаются другими токсическими изменениями, гигантские нейтрофилы могут быть вызваны дискразией костного мозга пуделя, вирусной лейкемией кошек (FeLV), дефицитом кобаламина, химиотерапией некоторыми препаратами или быть частью неопластической пролиферации нейтрофилов.
f. Гиалинизированные ядра считаются токсическим изменением, но могут также свидетельствовать об ухудшении состояния или аутолизе.
g. Токсичные гранулы в человеческих нейтрофилах представляют собой содержащие ферменты (например, эластазу, миелопероксидазу) и кислые мукополисахариды лизосомоподобные гранулы (первичные гранулы), образующиеся в предшественниках нейтрофилов (стадия програнулоцитов), которые остаются заметными на более поздних стадиях, а не становятся незаметными, как в норме. Они окрашиваются более базофильно, чем вторичные гранулы, и, как правило, распределены неравномерно. Они редко встречаются у домашних млекопитающих и встречаются в основном у лошадей. Если все нейтрофилы особи имеют необычно выраженные и диффузно распределенные пурпурные цитоплазматические гранулы, особенно без других токсических изменений, это может быть связано с окрашиванием или индивидуальной вариацией, а не с токсическими изменениями. Это чаще всего встречается у жеребят.

2. У клинически здоровых кошек примерно в 50 % нейтрофилов могут содержаться маленькие тельца Деле, при этом менее 1/3 пораженных нейтрофилов содержат более двух телец Деле (неопубликованные данные доктора Джулии Стикл, основанные на мазках крови более чем 40 здоровых кошек). Если обнаруживается или сообщается о таком количестве телец Деле, это не следует интерпретировать как признак воспаления. Наличие этих “токсических изменений” в нейтрофилах здоровых кошек может объяснить, почему концентрация лейкоцитов и нейтрофилов была нормальной примерно у 50% кошек с токсическими нейтрофилами, а у 43 % из них токсические изменения были единственным гематологическим признаком воспаления (сдвиг влево отсутствовал, а концентрация лейкоцитов и нейтрофилов была нормальной).

3. Нейтрофилы с токсическими изменениями обычно ассоциируются с тяжелыми бактериальными инфекциями, но могут быть обнаружены и при неинфекционных состояниях, в том числе после введения G-CSF, при воспалении, вызванном скипидаром, и при дискразиях, вызванных цефоницидом или цефазедоном. Простое наличие сдвига влево не является токсичным изменением.

4. Токсические изменения могут быть классифицированы на основе типов и степеней токсических изменений, но системы классификации не были стандартизированы, и отсутствуют данные о прогрессировании токсических изменений в ответ на различные степени воспаления (т.е. какие изменения происходят при различных степенях воспаления).
а. В целом, чем более многочисленны и выражены токсические изменения, тем более серьезным может быть воспалительное состояние.. Тяжелые токсические изменения были связаны с неблагоприятным прогнозом у собак, а умеренные или тяжелые токсические изменения были связаны с неблагоприятными исходами у лошадей.
б. Системы классификации, использованные для получения этих выводов, были относительно сложными и требовали дифференциации того, какой процент нейтрофилов поражен (<10%, 10–30%, >30%) очаговой базофилией (тельца Деле), диффузной базофилией, «вакуолизацией» (цитоплазматическим просветлением) и ядерной гиперсегментацией, а также степени (легкая, умеренная или выраженная) каждого цитоплазматического изменения. Воспроизводимость такой градации среди отдельных лиц и лабораторий, вероятно, лишь умеренная, и не было показано, что она влияет на лечение пациентов или исход по сравнению с простым сообщением о наличии токсических изменений и указанием случаев, когда они кажутся серьезными, — подходом, который лаборатория автора (MAS) использует уже много лет.

5. Токсичные нейтрофилы (особенно палочкоядерные и метамиелоцитарные стадии) можно спутать с моноцитами, когда они становятся диффузно базофильными, особенно если они крупные.
а. Если такая клетка представляет собой токсичную палочкоядерную клетку, аналогичные токсические изменения должны присутствовать и в сегментоядерных нейтрофилах.
б. В некоторых случаях незрелые токсичные нейтрофилы невозможно достоверно отличить от моноцитов в мазке крови, окрашенном по Романовскому. В этих случаях точность лейкоцитарно-лейкоцитарно-клеточной формулы может быть не так важна, как понимание того, что сдвиг лейкоцитарной формулы влево и токсические изменения указывают на наличие у животных тяжёлых воспалительных заболеваний.

6. Тельца Дёле могут образовываться in vitro со временем, чаще при комнатной температуре, чем при 4 °C. Чаще всего это одиночные мелкие точечные базофильные включения, а не более крупные и разнообразные тельца Дёле, наблюдаемые при воспалении (рис. 2.12F). Их постоянное появление в нескольких или многих нейтрофилах старого образца указывает на феномен in vitro, а не на токсические изменения in vivo, хотя могут присутствовать и другие дегенеративные изменения, дополнительно имитирующие токсические изменения. Это повреждение, вызванное накоплением, является одной из многих причин, по которым следует исследовать мазки свежей, а не старой крови.

1. Гиперсегментированные нейтрофилы имеют увеличенное число дефинитивных ядерных долей, разделенных нитями, - пять или более у большинства видов и, возможно, семь или более у лошадей.
2. Чаще всего это старые нейтрофилы, которые дольше остаются в крови из-за снижения апоптоза или снижения регуляции молекул адгезии, вызванного увеличением кровотока. Раздел I.B). Эффект старения также можно рассматривать как результат замедленного анализа образцов in vitro, хотя у большинства таких нейтрофилов ядра набухают и они кажутся более незрелыми.
3. Гиперсегментация нейтрофилов также возникает по невоспалительным причинам (см. раздел Ядерная гиперсегментация, не связанная со старением клеток).

1. Псевдопельгер-Хюэт-нейтрофилы встречаются у коров, а иногда и у лошадей, альпак, лам и собак при воспалительных заболеваниях. Временным дефектом является асинхронное созревание нейтрофилов с гипосегментированными нейтрофилами, но зрелым хроматином; некоторые нейтрофилы похожи на клетки Пельгера-Хюэта (см. аномалию Пельгера-Хюэта в следующем разделе V), но другие — нет. Обычно при воспалении присутствуют и другие токсические изменения.
2. Псевдопельгер-Хюэт-эозинофилы описаны у крупного рогатого скота и лошади. У крупного рогатого скота они обнаруживались одновременно с псевдопельгер-Хюэт-нейтрофилами. У лошади они обнаруживались одновременно с выраженной эозинофилией. 3. Клетки псевдопельгера-Хьюэта также образуются при некоторых гемических новообразованиях и при воздействии определенных лекарственных средств и ионизирующего излучения (см. Невоспалительная аномалия псевдопельгера-Хьюэта в следующем разделе VI).

1. Реактивные лимфоциты (плазмацитоидные лимфоциты, иммуноциты, трансформированные лимфоциты и вироциты) представляют собой стимулированные Т-лимфоциты или В-лимфоциты и могут быть обнаружены в крови животных с различными острыми и хроническими воспалительными заболеваниями. Они часто встречаются у молодых животных, которые постоянно подвергаются воздействию новых антигенов окружающей среды.
2. Реактивные лимфоциты можно обнаружить в большинстве образцов крови, но их увеличение является неспецифическим признаком воспалительного заболевания. Распознавание увеличения является субъективным и может зависеть от внешнего вида лимфоцитов, концентрации лимфоцитов и процентного содержания лимфоцитов, которые кажутся реактивными.
3. Реактивные лимфоциты могут иметь различные структурные особенности, которые считаются реактивными изменениями, наиболее характерными из которых являются увеличение объема цитоплазмы и повышенная цитоплазматическая базофилия (посинение). Другими признаками, которые могут присутствовать, являются околоядерный ореол, выраженная фокальная зона Гольджи и эксцентричные, увеличенные, расщепленные, извитые, двулопастные или митотические ядра; некоторые клетки могут казаться плазмацитоидными. Относительно большое количество цитоплазмы без базофилии не является явным свидетельством реактивных изменений, поскольку некоторые гранулярные лимфоциты (крупные гранулярные лимфоциты) обычно имеют больше цитоплазмы, чем другие лимфоциты. Однако повышенная концентрация гранулярных лимфоцитов может свидетельствовать о реактивном (воспалительном) процессе.
4. Отдельные реактивные лимфоциты может быть невозможно отличить от неопластических лимфоидных клеток, особенно у крупного рогатого скота. Их также может быть трудно отличить от незрелых или реактивных моноцитов и, возможно, от ранних до средних стадий эритроцитов.

Моноциты могут иметь повышенную базофилию цитоплазмы и ядра округлой или яйцевидной формы (более незрелые) (реактивные моноциты), что может сделать их неотличимыми от реактивных лимфоцитов, но любой тип клеток свидетельствует о воспалении. Они также могут быть трансформированы макрофагами с большими круглыми или овальными ядрами и относительно обильной сине-серой цитоплазмой с вакуолями или без них (рис. 2.14). Такие клетки наблюдаются при некоторых воспалительных заболеваниях, включая системные грибковые заболевания, эрлихиоз, лейшманиоз и иммуноопосредованные расстройства. В одном ретроспективном исследовании редкое присутствие по меньшей мере трех макрофагоподобных клеток в мазке крови наблюдалось у собак с тяжелым воспалением или неоплазией и было связано с нейтропенией, сдвигом влево, тромбоцитопенией, анемией, бицитопенией и панцитопенией. В некоторых случаях макрофагоподобные клетки, вероятно, были неопластическими гистиоцитами. Хотя воспалительные макрофаги могут образовываться из циркулирующих моноцитов, они также могут попадать в кровь из других тканей (например, печени, селезенки, костного мозга).

1. При обычном окрашивании по Романовскому в нейтрофилах пациентов с бактериемией могут быть обнаружены базофильные бактериальные палочки или кокки, иногда в сопровождении внеклеточных бактерий. Такие пациенты часто находятся в терминальной стадии. При наличии этих бактерий необходимо попытаться определить, представляют ли они собой бактериемию или образец, загрязненный бактериями (проверьте правильность обращения с образцом).
2. Микобактериальные палочки могут присутствовать в мазках крови пациентов с системными инфекциями, вызванными Mycobacterium spp. Они уникальны тем, что не окрашиваются по Романовскому (отрицательная реакция окрашивания) и, таким образом, проявляются в виде одной или часто нескольких прозрачных бактериальных палочек внутри макрофагов или нейтрофилов.

1. Эрлихии (Ehrlichia spp.) и лейкоцитарные виды Anaplasma spp. проникают в некоторые лейкоциты многих видов и размножаются в цитоплазматических вакуолях (таблица 2.18). Образующиеся скопления организмов (от 2 до > 20) называются морулами (ед. ч. morula, лат. шелковица). Диаметр этих скоплений обычно составляет 1,5–4,0 мкм, а окрашивание по Романовскому – от бледно- до тёмно-синего цвета. При гранулоцитарных формах на один лейкоцит может приходиться более одной морулы. Морулы не следует путать с тельцами Деле, тромбоцитами, лежащими на лейкоцитах, или пузырьками ядерной мембраны.

а. Морулы E. canis могут быть обнаружены в моноцитах или лимфоцитах крови поражённых собак или кошек, особенно в эндемичных районах. В редких случаях морулы E. canis обнаруживались в нейтрофилах и эозинофилах.
b. У собак, инфицированных E. ewingii, морулы присутствуют в 0,1–10% нейтрофилов в первые несколько дней болезни, но в дальнейшем встречаются редко.
c. Морулы обнаруживаются у многих собак, лошадей, жвачных животных и кошек, инфицированных A. phagocytophilum, причем эти микроорганизмы обычно присутствуют в 5–30% нейтрофилов в течение первых 10 дней инфекции. В редких случаях они были обнаружены у
альпак и лам.
d. У собаки, инфицированной Panola Mountain Ehrlichia sp., морулы не обнаруживались, но редкие морулы были обнаружены в негранулоцитарных клетках коз, инфицированных этой бактерией. Были зарегистрированы случаи заражения собак E. muris; морулы можно было бы ожидать в негранулоцитарных лейкоцитах.

2. В течение многих лет анаплазменные возбудители, которые заражали лейкоциты, были отнесены к роду Ehrlichia. Методы молекулярной диагностики, включая анализ 16S рРНК, привели к переклассификации нескольких организмов, которые ранее считались возбудителями эрлихиоза и которые под микроскопом выглядели схожими. Некоторые из них были отнесены к роду Anaplasma, другие - к Neorickettsia. Уместность системы номенклатуры, полностью зависящей от таких генетических последовательностей, была поставлена под сомнение.

3. Анаплазматические виды, которые заражают домашних млекопитающих, обычно рассматриваются отдельно от тех, которые заражают людей (Ehrlichia chaffeensis и Neorickettsia sennetsu), но были обнаружены человеческие изоляты, которые нельзя было отличить от E. ewingii с помощью секвенирования нуклеиновых кислот и ПЦР-анализа, а Ehrlichia chaffeensis был идентифицирован у собак. Кроме того, возбудители, ранее считавшиеся отдельными видами (E. equi, E. phagocytophila и гранулоцитарная эрлихия человека) в настоящее время считаются одним организмом, называемым Anaplasma phagocytophilum, хотя, по–видимому, существуют разновидности, основанные на селективной способности различных изолятов вызывать заболевание у разных видов. Генетические варианты встречаются в пределах одного вида и в одном географическом районе.

1. Это простейшее, мерозоиты которого заражают собачьи нейтрофилы или моноциты, образуя гамонты (также называемые гаметоцитами). До 1997 года североамериканский организм классифицировался как H. canis. В Северной Америке он встречается вместе со своими клещевыми хозяевами и переносчиками в основном в Южных штатах или на побережье Мексиканского залива, но также в западных, центральных и северо-восточных штатах. Он вызывает гепатозооноз американских собак, клинические признаки которого включают лихорадку, боль, хромоту и выделения из глаз. Пораженные собаки часто умирают в течение 1-2 лет, если их не лечить, и хотя лечение не является излечивающим, оно может устранить клинические признаки.
2. Обнаружение гамонтов H. americanum в моноцитах или нейтрофилах крови в клинических случаях встречается очень редко; при их наличии процент инфицированных лейкоцитов, как правило, очень низок. Гамонты имеют форму от овальной до эллиптической, бледно-голубые, размером около 9 × 4 мкм. Они могут заполнять цитоплазму клетки и вызывать периферическое смещение клеточного ядра. Организм может покинуть клетку и оставить не окрашивающуюся область, окруженную капсулой.
3. Инцистированные формы простейших часто встречаются в скелетных мышцах, и биопсия скелетных мышц является одним из методов подтверждения диагноза.
4. Общие лабораторные данные в клинических случаях включают нейтрофильный лейкоцитоз (иногда выраженный и лейкемоидный), нормоцитарную нормохромную нерегенеративную анемию, тромбоцитоз, повышение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови, гипогликемию (которая может быть вызвана потреблением глюкозы лейкоцитами in vitro), гипоальбуминемию и соответствующую гипокальциемию. Существует слабая перекрестная реактивность антител к H. americanum и антител к H. canis.